小中大我们是用SD大鼠的卵巢，提前注射孕马血清。用注射针头将卵泡在解剖镜下刺破，并挤出颗粒细胞。然后在离心管内吹打分散。
我们用的是15％胎牛血清，DMEM培养基。
颗粒细胞是贴壁细胞。但是死的颗粒细胞是不贴壁的。
我注意到你进行了细胞计数，但是没有用台盘兰染色来进行计数。死细胞被台盘兰染成蓝色，而活细胞不被染色。计数时，只计数活细胞数目。死细胞是不贴壁的，所以活细胞的数量才是用来进行接种的参照。
另外，我们用的是15％胎牛血清。你用的是10％的小牛血清。
我分析：主要问题还是出在计数上，次要的是血清问题。
