细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]大黄素的溶解及除菌

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[求助]大黄素的溶解及除菌

mickeylin[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79369
精华 0
积分 461
帖子 582
信誉分 100
可用分 3756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
1
 

[求助]大黄素的溶解及除菌




本人要做大黄素对培养细胞的影响,现在大黄素不能溶于培养基,用二甲亚砜溶解后加入清水是橙黄清亮了,一过虑,虑液又变无色了,滤器上一层黄色,很明显大黄素被虑除了。请教大黄素的溶解及除菌方法!有人说二甲亚砜或氯仿可以溶,那对细胞影响吗?急,谢谢!
顶部
idea2011[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77656
精华 0
积分 552
帖子 783
信誉分 100
可用分 4726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
2
 
既然用水稀释DMSO溶解的大黄素都不会沉淀下来,那用培养基来稀释也应该没什么问题。你可以先用DMSO溶解,-20℃保存;使用的时候直接用除了菌的培养基稀释就行了(注意无菌操作),不用再除菌了。

DMSO在小于1%的浓度下应该对细胞没什么影响。当然,如果能尽量减少DMSO的终浓度那就再好不过了。
顶部
mickeylin[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79369
精华 0
积分 461
帖子 582
信誉分 100
可用分 3756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
3
 

非常感谢!可是我们买的1g大黄素是塑料袋装的,用的时候还称量,大黄素可以先怎么做处理?高压除菌可以吗?
顶部
idea2011[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77656
精华 0
积分 552
帖子 783
信誉分 100
可用分 4726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
4
 

大黄素不用处理,因为DMSO能杀菌,用DMSO溶解后根本就不可能有活细菌等在DMSO溶液中存在。不过,你在吸取大黄素的DMSO溶液的时候,一定要小心,枪头不能接触装大黄素DMSO溶液的容器。
顶部
hyuu[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79232
精华 1
积分 626
帖子 847
信誉分 102
可用分 5149
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-8
状态 离线
5
 

我做过预试了,加了1%DMSO细胞仍然可以长得很好。请问zcjia,加了DMSO在培养基中,是不是其它组需要对照?在讨论我的结果的时候是否需要讨论DMSO和干预因素的协同或拮抗作用?谢谢!
顶部
ladyhuahua[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76658
精华 0
积分 984
帖子 1667
信誉分 100
可用分 9116
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-8
状态 离线
6
 
我用二甲亚砜配制的大黄素完全不能遇见水,一丁点水大黄素就会析出。请问extra16 有嘛得窍门,望不吝赐教
顶部
pencil菲[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75646
精华 1
积分 410
帖子 476
信誉分 102
可用分 3191
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
7
 

可以试试用100%的DMSO溶解,然后按需要浓度的量直接加到培养液中。
因为用生理盐水稀释的时候,稀释的倍数小,就会有药物析出来,直接加到培养液中由于稀释倍数足够大,就不会有药物析出了。
顶部
mickeylin[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79369
精华 0
积分 461
帖子 582
信誉分 100
可用分 3756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
8
 

谢谢群友的回帖,事实上用细胞专用的DMSO溶解的大黄素仅仅只用1ul的量加入200ul培养液中,依然可见沉淀,细胞就会死亡。我现在是一点办法也没有。
顶部
一叶[使用道具]
超级版主
Rank: 8Rank: 8


UID 73286
精华 0
积分 1481
帖子 2541
信誉分 100
可用分 13501
专家分 0
阅读权限 150
注册 2011-9-21
状态 离线
9
 
看了你的第一贴,你的步骤搞反了:
我们两个的试验做的很像,你先用高级别纯DMSO溶解药物,然后过滤,呵呵,虽然说DMSO可以杀菌,还是过虑一下放心一点,配成母液,然后按照你所需要的浓度加入生长液。一般DMSO的终浓度低于0.1%,也有说低于1%。我们用的是低于0.1%。
这时,当用生长液稀释母液时,仍有少量沉淀,一般对细胞不会有影响。但我也觉得这样药物可能会有一点浓度的变化,但我的师兄师姐都是这样做的。你只要MTT做的准,这也不是问题。
我的试验就快做完了,不想再试了,我觉得如果将DMSO的终浓度的限制稍微提高一点,可能沉淀会很少的,你可以试一试。
顶部
mickeylin[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79369
精华 0
积分 461
帖子 582
信誉分 100
可用分 3756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
10
 

到底是高手,水平就是高。很是感谢,我决定按你的建议再试验一次,我还是有一些担心,因为我试了很多次,总有沉淀,感觉大黄素全析出了似的。唯一与你不同的是我没有抽滤。
顶部