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标题:[求助]冷冻细胞老是爆管，坏了无数样本！

tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-2-24 12:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]冷冻细胞老是爆管，坏了无数样本！




我做细胞冷冻，样本加进冷冻液（甘油、蛋白、培养液），装进冷冻管，再装进铁的吊桶里，用胶布封住吊桶口，4度平衡30分钟，液氮上放10分钟，再缓慢放进液氮里。解冻时，直接从液氮罐中拿出，室温复温。但是过一两分钟后，就接二连三的听见“砰”放鞭炮一样的声音，去看时爆了好多冷冻管，不是盖子飞了，就是瓶身破了。郁闷啊，究竟怎么回事啊？我已经爆了好多管了。
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发表于 2012-2-24 12:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
试试-20和-80度看看,如何
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-2-24 12:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 101010 的帖子

我需要在液氮－196的低温中的冷冻。还有别的解决方法吗？
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guagua[使用道具]
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发表于 2012-2-24 12:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哪里产的冻存管？我用过一两百支greiner和Nunc（绝大多数是前者）的冻存管，从来就 没有爆过。另外，楼主可试一下直接将冻存管扔进40度的水浴中（500ml以上的大烧杯），我就一直这样干的。
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cj_mondy[使用道具]
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发表于 2012-2-24 12:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得是不是你的冻存管没拧紧？液氮进到冻存管里了，取出时液氮急速膨胀造成爆裂~~。
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cj_mondy[使用道具]
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发表于 2012-2-24 12:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得是不是你的冻存管没拧紧？液氮进到冻存管里了，取出时液氮急速膨胀造成爆裂~~。还有你室温复温有些问题吧，细胞复苏讲究慢冻速溶，要在37度水浴中快速摇动，或是按Pathway的办法。
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-2-24 12:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢大家！我今天拧紧再试试。因为暴管，所以不敢放到水浴里复温。更不敢用烧杯了，连烧杯一起爆飞，才壮观呢。
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gogo[使用道具]
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发表于 2012-2-24 12:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

解冻的程序不对。

要不要我copy一段标准protocol给你？
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is2011[使用道具]
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发表于 2012-2-24 12:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用针在eppendorff管上扎个小孔就不会爆，小孔很小不会污染药品的
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铜雀[使用道具]
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发表于 2012-2-24 12:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
取出冻存管后，先让气体跑光（就是听不到嗤嗤声），然后置于42度水中快速融化。
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