[求助]分离的巨噬细胞大小不一

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标题:[求助]分离的巨噬细胞大小不一

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发表于 2012-3-5 16:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教做过大鼠腹腔巨噬细胞培养的朋友，我分离的巨噬细胞圆形，大小不一，培养2天后有的细胞变成梭形，不知道是不是这样的，分离的是不是巨噬细胞啊。

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2012-3-5 16:57

61640865.snap.jpg (28.32 KB)

04906[使用道具]
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发表于 2012-3-5 16:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我在用单核细胞培养DC时也看到了这种梭型细胞，也怀疑是巨噬细胞

ritou1985[使用道具]
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发表于 2012-3-5 17:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

没有高手指教一下吗，楼上的朋友，问一下，是人外周血单核细胞吗，还是细胞株？

qhyu[使用道具]
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发表于 2012-3-5 17:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的也是，培养两天有少数也呈现梭形，我还以为是分离的当天就有其他的细胞混杂在里面的呢。不过我分离的没有搂主的小小的那种细胞

dog002[使用道具]
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发表于 2012-3-5 17:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我感觉你培养的巨噬细胞中还有其他细胞，也就是说你从腹腔取出来的时候可能带出其他细胞。这样有的时候巨噬细胞会吞噬掉其他细胞。就是不知道你噬用什么方法分离出巨噬细胞的

yysr238[使用道具]
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发表于 2012-3-5 17:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

梭形的看上去有点像黑色素瘤细胞

911[使用道具]
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发表于 2012-3-5 17:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

感觉杂细胞比较多

yes4[使用道具]
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发表于 2012-3-5 17:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我把我的看法写在这里，希望看到的朋友继续讨论：
图上看那些小而亮的应该是凋亡细胞碎片，少量梭型的可能是成纤维细胞，中等大小的圆形细胞应该就是巨噬细胞，你已经养两天了，如果细胞状态好的话这些巨噬细胞应该有树枝状突起，你的仍然成圆球形，所以我觉得状态不是很好，我也养腹腔巨噬细胞，照片贴出来你可以自己对照一下，不算好，但是巨噬细胞特征还是有的。如果存在什么问题，还请前辈们多多指教，让我们都继续进步，谢谢！

附件

2012-3-5 17:09

52310861.jpg (17.99 KB)

shenkunjie[使用道具]
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发表于 2012-3-5 17:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我也正在分离大鼠/小鼠腹腔巨噬细胞培养，我们一般的做法是细胞接种2-3小时后，待细胞贴壁后，用D-Hank's液轻轻洗涤细胞2-3次，除去贴壁不牢固的成纤维细胞，然后再加入新鲜培养基继续培养或进行其他的处理。
看了楼上的图后，我觉得那些梭形的细胞可能是成纤维细胞，不知楼主是否经过洗涤的步骤处理。
除此之外，收集原代腹腔巨噬细胞时，要注意不能混有血细胞（即从鼠腹腔中吸出的液体不应为红色），如果含有大量的血细胞会影响巨噬细胞的生长，我认为图中特别小的细胞可能为细胞碎片或红细胞。

lixi559[使用道具]
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发表于 2012-3-5 17:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有没有关于人外周血巨噬细胞的分离培养与纯化我最近正在做但是用淋巴细胞分离液提取出来的PBMC杂质很多（应该是血小板），分离一小时贴壁细胞得率很低，最烦的是用1640 10%太牛血清完全培养基培养细胞贴壁后第二天再看的时候细胞都死了不知道是怎么回事现在还没有找到原因请有经验的战友帮忙分析一下我分离出来以后没有用细胞因子刺激培养