细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [讨论帖] PC12细胞

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 24  1/3 123››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[讨论帖] PC12细胞

彼岸花opp[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 78567
精华 0
积分 221
帖子 162
信誉分 100
可用分 1576
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-30
状态 离线
1

发表于 2012-3-6 14:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[讨论帖] PC12细胞



看到大家成立了各种细胞培养的互助小组，这里面没有我现在需要探讨的PC12细胞的，就模仿前面的同志建立一个PC12的小组。
PC12细胞是大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株，具神经内分泌细胞的一般特征，因其具可传代特点，广泛应用于神经生理和神经药理学研究。
现在我开始培养这种细胞,发现长得挺慢的,长满90%按1:4传代,要长5天左右才能再次传代。喜欢聚堆生长，不似一般肿瘤细胞贴壁生长成单层，而是可以重叠成几层。细胞有几种亚型，同一瓶里面，大概有三种形态，一是很贴壁长成多触角，细胞摊开面积大较薄；二是三角型，贴壁但比较有立体感，三是球型，不贴壁，体积最小。
不知道我观察到的这些状况是否为该细胞正常状态，望有经验的同志们讨论讨论，共同养好细胞，为下一步做实验打好基础。
顶部
彼岸花opp[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 78567
精华 0
积分 221
帖子 162
信誉分 100
可用分 1576
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-30
状态 离线
2

发表于 2012-3-6 14:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
上一张ATCC的PC12图片，和我培养的有点不同，但我现在不能拍照，如果有其他同志在培养，可以拍照的，传点相片上来看看吧。听说很多细胞株到了各实验室在性状上会有所变化，不知是否真的这样。


查看积分策略说明
附件
2012-3-6 14:13
24972331.snap.jpg (51.63 KB)
 
顶部
小野花[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76741
精华 1
积分 299
帖子 293
信誉分 102
可用分 2211
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
3

发表于 2012-3-6 14:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
高分化PC12细胞，购自上海细胞研究所。


查看积分策略说明
附件
2012-3-6 14:14
94322802.snap.jpg (6.02 KB)
 
顶部
彼岸花opp[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 78567
精华 0
积分 221
帖子 162
信誉分 100
可用分 1576
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-30
状态 离线
4

发表于 2012-3-6 14:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #3 小野花 的帖子

你的图片很清楚,我养的细胞没有长这么漂亮,感觉破破烂烂的,有触角的细胞不止三个触角,而且在壁上摊得很开,触角细细长长。少部分细胞胞体表面有很多小泡，看起来似凋亡细胞。但是却不凋亡，只是感觉状态不好了，不知是否细胞整体就步入衰老期了？
另，关于这株细胞，血清的使用比例大家是怎么配的？看文献在马血清和胎牛血清的使用上很不同。大部分文献是10%马血清，5%胎牛。而ATCC更是15%马+2.5%胎牛。
马血清的作用有促进分化吧？没查到资料明确说明马血清作用。
1640和DMEM到底有多大区别？绝大部分人都用1640,也有小部分用DMEM,而ATCC是说用F12。
顶部
caihong[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73197
精华 1
积分 795
帖子 1206
信誉分 102
可用分 6856
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
5

发表于 2012-3-6 14:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是啊，前几天和别人要了最后一管PC12细胞，结果回来复苏的时候，时间好像长了，第二天发现没什么细胞了，好像被我弄丢了，55555555我已经养了3天了，感觉没几个细胞，可是离心的时候看到底部应该是有细胞了的阿。我要哭死了，哪个有卖点给我啊，我在重庆。
顶部
caihong[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73197
精华 1
积分 795
帖子 1206
信誉分 102
可用分 6856
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
6

发表于 2012-3-6 14:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用的是1640。10%马血清，5%胎牛血清和双抗。
顶部
caihong[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73197
精华 1
积分 795
帖子 1206
信誉分 102
可用分 6856
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
7

发表于 2012-3-6 14:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我刚才又去看了哈细胞，好像又找到了，但不知道是不是，发上来请你们帮我看看，如果是的话那我以前肯定是看错了。


查看积分策略说明
附件
2012-3-6 14:19
23276715.snap.jpg (11.73 KB)
 
顶部
caihong[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73197
精华 1
积分 795
帖子 1206
信誉分 102
可用分 6856
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
8

发表于 2012-3-6 14:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的倒置显微镜没照相的了，我是用别人的数码相机照的。技术不好。而且本来这个细胞已经被原来的老师传了几次了，可能本身性状也变化了，大家帮我看看里面是否有我的PC12细胞呢？谢谢。


查看积分策略说明
附件
2012-3-6 14:21
72674789.snap.jpg (14.27 KB)
 
顶部
loli[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 71788
精华 0
积分 736
帖子 1171
信誉分 100
可用分 6650
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-31
状态 离线
9

发表于 2012-3-6 14:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

pc12细胞分为分化的和没有分化的，只有分化了的PC12才具神经内分泌细胞的一般特征，广泛应用于神经生理和神经药理学研究。
没有分化的细胞就象ATCC上面的那张图片一样，而已经分化的细胞就象“xiaozixiaozizi ”那张图片一样，他（她）那张蛮漂亮的，没有分化的是多边形的，分化了的是长梭型的，
楼上的，从你上传的照片看，你的基本看不到很好的贴壁的细胞
顶部
66+77[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75637
精华 1
积分 596
帖子 785
信誉分 103
可用分 4751
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
10

发表于 2012-3-6 14:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养了没有分化的.长得要死不活的,基本上只是看看,要用时吹下来取一些,补加些培养液(使用ATCC推荐的),很久不用就过一两周换一次培养液(吹起,放离心管中自然沉淀,吸走上层,加培养液分到培养皿中培养),在一次性塑料培养皿上包被collagen或PLL都可以使分布均匀,贴壁良好,用我们公司的高结合力培养器皿和包被collagen相当或贴得更牢一些.其他实验我很少做,也就不清楚了.
顶部
 24  1/3 123››