[求助]mcf-7培养

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标题:[求助]mcf-7培养

乌贼老弟[使用道具]
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发表于 2012-3-6 15:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问下各位养过乳腺癌细胞MCF-7的同道们，我查阅的文献都说用10％的小牛血清就可以了，怎么我养的用10％的胎牛加胰岛素一星期时间了都还没长满还没传代？到底MCF-7是好养呢还是肿瘤细胞里面的例外？请指教！非常感谢！

66小飞侠[使用道具]
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发表于 2012-3-6 15:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 乌贼老弟的帖子

MCF-7很好养的。你的培养方法或者细胞有问题。

guagua[使用道具]
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发表于 2012-3-6 15:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

MCF-7用10%的小牛血清就好了，一般一传三，两三天就可以长满。但是，细胞有密度依赖性，如果密度太低，就比较困难了。
MCF-7长满了是一片一片的，不是非常分散。

dotaaa[使用道具]
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发表于 2012-3-6 15:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼主是在中科院细胞库买的细胞吧，这个细胞好像就是慢一些，去年我养过，当时大概也是要将近一周才能传代，所以楼主在传代的时候细胞密度要大一些吧，也是不容易分散开！

大白菜[使用道具]
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发表于 2012-3-6 15:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

赞同小胶质细胞，MCF-7的确有密度依赖性，最好密度高一点传代，一传三就可以，但是又不能长得太满，如果长太满细胞就会聚成团，不容易吹散，最多三天就要传代。

101010[使用道具]
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发表于 2012-3-6 15:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

赞同小胶质细胞，有密度依赖性，3-4天传代，天气热胰酶消化时间短些，防止成片脱落

zzzz[使用道具]
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发表于 2012-3-6 15:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的mcf-７10％的胎牛长得挺好，但是复苏总出问题。冻存后复苏3ｈ后基本都贴壁（圆形贴壁），为了消除DMSO的毒性，换液但是第二天就只有靠近细胞培养瓶底的细胞伸出伪足，中部细胞数量少，甚至脱壁，第三天细胞液变黄浑浊，细胞生长状况不好。已经好几次了，是污染了吗？是冻存使污染了还是复苏后污染？冻存mcf-７细胞密度究竟多大合适？
敬请高手赐教，谢了

lagua123[使用道具]
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发表于 2012-3-6 15:11 资料个人空间短消息加为好友

小中大

mcf-7细胞培养，我认为10%胎牛长得不错，
一般长满瓶底的80%就可以传代或者冻存，
我用的是玻璃培养瓶，重复使用的，大概是底25cm2，容积100ml的，
传代是1传3，冻存是1动2，
我已经不用计数，
这个比例不论是冻存传代还是复苏都很好的。
至于楼上的问题，我觉得可能是污染。

mamamiya[使用道具]
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发表于 2012-3-6 15:11 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我养的MCF-7长的也很慢，有时一周都长不满，感觉非常难养，但论坛上大家都说很好养！

该细胞株购自中科院的，是不是中科院的细胞株有问题？

pencil菲[使用道具]
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