细胞世界

楼上说的对， 是加了酚红的缘故。

我们实验室，一直用的就是这个，效果挺好的阿~~~

楼上的，你的问题可能跟消化前培养基去除不够干净有关系，因为那样胰酶不能发挥它的作用啊。
建议：吸掉培养基后，用PBS洗一下，再加胰酶消化。
另外，你的细胞比较大的话，是消化时间长点，但一般不会超过5分钟的，加了胰酶后可以放在培养箱，这样温度高点，可以加快点速度。

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我做的是原代细胞的培养，在用胰酶消化组织之前就没有培养基，是直接用组织块剪碎之后消化的。

我在培养 比较大的细胞时，比如 Hela, Cos-7等细胞，都是用5ml的PBS清洗干净后，加Trypsin 1ml (像 293T细胞 我都是加 0.5ml的)。
之后，直接放入 37度培养箱 3min.
取出后，显微镜观察。
这个时候，细胞大多情况下还是贴壁的。
马上来回翻动，使液面不断冲击细胞，这样 不出1min， 细胞都会变成圆形，有的细胞可能已经脱落了。
这时，加入足够量的培养基，将细胞打落。

这样的 大细胞，或者贴壁能力强的细胞，转代时要多费一点心思。

Trypsin 处理时间长了（5min 以上），对细胞不好的。

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呵呵，你说的是细胞系的培养。我说的原代的培养。成细胞系的那些细胞，贴壁能力都是非常强的，而且消化的时候也很好消化，但是原代的就不是那么容易了。