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标题:[讨论帖]心肌细胞培养最好的培养基?

remenb[使用道具]
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[讨论帖]心肌细胞培养最好的培养基?




因为我养心肌细胞,以前用的是DMEM高糖,觉得细胞长的不好,查文献见到:
乳鼠心肌细胞培养培养基可以用EMEM,MEM,DMEM,M199,MCDB107液,DMEM/F12液,其中以DMEM/F12液最佳,ph值为7.2-7.4.
摘自:心肌细胞培养进展(2005 杨瑞丰 潘伟)

所以准备买dmem/f12的培养基,不知道大家用的都是什么?

搜索论坛未见明确答案,故讨论,希望大家踊跃发言,其他种属心肌细胞或者成年心肌细胞均可讨论!
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66小飞侠[使用道具]
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DMEM-F12 我用的这个,不过也是刚开始,做了3次,没有成功
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remenb[使用道具]
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DMEM-F12 我用的这个,不过也是刚开始,做了3次,没有成功

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能说说你的培养基的牌子和货号吗?
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bohe221[使用道具]
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我用的也是高糖的DMEM养乳鼠的心肌细胞,长的不好是怎么个不好法?
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我也用的DMEM高糖培养基,细胞长的还好,不过血清感觉用胎牛的好些
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我也要做这个
以前的实验室师姐就是用DMEM高糖加15%胎牛,长的都挺好的
现在的实验室老师希望我做鸡胚心肌,给的文献是DMEM/F12,ATCC的。
我自己查了些,发现GIBCO的种类特别多,不过ATCC的只有一种,正打算先用DMEM试方法,顺便等定的DMEM/F12到货
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QUOTE:
原帖由 remenb 于 2012-3-7 10:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')



因为我养心肌细胞,以前用的是DMEM高糖,觉得细胞长的不好,查文献见到:
乳鼠心肌细胞培养培养基可以用EMEM,MEM,DMEM,M199,MCDB107液,DMEM/F12液,其中以DMEM/F12液最佳,ph值为7.2-7.4.
摘自:心肌细胞培养进展(2005 杨瑞丰 潘 ...

DMEM就行
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remenb[使用道具]
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反馈:我用的是gibco的dmem/f12,四季青的无噬菌体低内毒素优级血清,15%完全培养基,非常好,24小时细胞就90%同步搏动了,哗哗的,喜人!
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dmem/f12养原代心肌,依赖于开始养的细胞状态。dmem/f12可能开始会使细胞状态可以,提前拨动,但也会让细胞提前老化,所以很难控制最佳状态,提高血清会提高细胞的贴壁率,当然也会带来成纤维的干扰,事实上有点成纤维,心肌会长的更好。HG-dmem+10%FBS养,感觉状态比较好控制,次日下午就可以看到跳动,第三天同步搏动就可以开展实验了,之后细胞呈老态化,数目减少,成聚,个个像个会搏动的向日葵。
我们这里使用培养液,买的干粉配置,所以很麻烦
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pengke1983[使用道具]
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反馈:我用的是gibco的dmem/f12,四季青的无噬菌体低内毒素优级血清,15%完全培养基,非常好,24小时细胞就90%同步搏动了,哗哗的,喜人!

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能说说你的具体培养心肌细胞的步骤吗?我现在是分离鸡心肌细胞,做了三次,都没有成功,没有跳动的,我想请教一下你的经验,谢谢了。
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