小中大我有点疑问,想问一下楼主:
1.楼主消化时什么组织,前人用什么方法消化,能否作为参考?
2.采用第二种方法你想得到什么,或者说这种方法获得的细胞是活力比较高还是数量多等?
3.你说的贴壁后,是什么贴壁后,细胞or组织还是细胞组织混合物?
4.组织中央的黑色东西为什么怀疑是胶原虫或者霉菌之类,有没可能是其它东西,比如血块或细胞聚集成簇?还是说是污染后你发现有黑色的东西,然后怀疑是胶原虫或者霉菌之类的污染?
其实,我个人认为你说的两种方法并不是绝对的对立,首先你要清楚如果选择第一种方法,那麽它致命的缺点是什么,这种缺点能否改善,这种缺点是否会导致你的结果很差;如果选择第二种方法,那麽优缺点又是什么;这两种方法能否联系起来,其实方法都是前人建立的,你也可以建立起适合你们实验需要的方法的,不一定完全照本宣科的,你说呢
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谢谢,现在第一种方法已经否决了,组织培养太慢,老年鼠即使能养出来,也没有活力。我的组织是膀胱,查的文献绝大部分是我说的第二种方法酶消化结合组织块法,采用第二种方法,我个人认为目的是同时得到细胞和未消化的组织(未消化的组织采用酶消化后变得松散,这样有利于细胞爬出),这仅仅是我个人的理解。贴壁是指细胞组织混合物。组织中央的黑色东西我现在觉得应该是死的组织团块,或者是剔除粘膜没有彻底清除。所以我觉得第二种方法最致命的缺点是有黑色东西,而且影响细胞的生长。我用第二种方法,同一天做,有时候有,有时候没有,所以排除了是试剂的原因。所以现在我换了酶,使细胞尽可能多点,然后过滤。目前正在观察。采用消化法,个人觉得最重要的是选择何种酶,浓度及消化时间。