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标题:[未解决]求助：人骨关节炎软骨细胞培养

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changjun_2006[使用道具]
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发表于 2012-3-12 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

求助：人骨关节炎软骨细胞培养

我培养人骨关节软骨细胞，培养2个月了，现在细胞不贴壁生长。细胞分离下来后都3~5个聚集在一起，过3天细胞都死了。
我是用胰酶、2胶原酶两步消化，2胶原酶消化5~8个小时，细胞都能下来，然后终止消化，离心，过滤，加胎牛培养液。用的一次性细胞瓶。


不贴壁是什么原因？
细胞消化长死了？
细胞瓶有问题？要处理？
细胞表面粘连物使细胞聚集不下沉？
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  • miracle   2012-3-12 16:47  可用分  +2   鼓励坛友发起话题交流！欢迎常来！ ...
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发表于 2012-3-14 15:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
长时间的酶消化法对细胞的伤害很大，会影响细胞的贴壁能力和分裂能力，你可以采用酶的热消化法，一般采用37℃消化45min-1H，这样做试试，如果贴壁能力还是很差的话可以加入一些促粘附因子，硫酸软骨素等，及促生长因子
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