细胞世界

手上也做了十多个稳定克隆细胞系了，可是越往下游做越迷茫。
有时候挑十几个单克隆才一两个阳性，咱也不去追究为什么没有稳定转染进质粒也有抗性了。可有时候空载体和目的载体各挑了两个克隆，鉴定阳性以后，却发现四个细胞很多蛋白表达各不相同。。。。于是惊讶，那么多文献只用一个克隆就能说事儿？做的越多，我越觉得稳定克隆很难去代表仅仅稳定表达了外源基因的原细胞系，变数太多了。细胞从转染到抗性筛选，到从单克隆长出来，外界施加的调控太多了，如果某基因对其下游的影响不是很高效的，或者不是很专一的，用稳定克隆的方法是很难去研究的。
请教高手们，稳定克隆的形成和外源基因的表达，哪个对细胞的影响或塑造更大一点？

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我是这么理解的：
1.没有稳定转染质粒也有抗性：细胞突变，对药物有耐受；
2.挑单克隆后蛋白表达不一：稳定表达细胞系，基因随机插入，当然有可能蛋白表达差异。但是目前我们的研究手段就这么些，这种情况下，混合克隆可能还更接近实际情况。