小中大各位战友：
我刚要开始养SP2/0，关于这种细胞的培养和传代方法看了一些，发现大家用的方法不尽相同，所以想请教一下有经验的前辈们，用哪种方法好一些？
换液：
1、直接弃去全部旧培养液，加入新的培养液即可；
2、只弃去部分培养液，瓶中保留少量的液体，再加入新鲜培养液；
3、先将细胞吹打起来，使所有细胞悬浮，收集细胞于离心管，800rpm,10min，弃去培养液，用新鲜培养液重悬。
4、将细胞瓶竖直放置，使悬浮的细胞因为重力沉淀，再吸取表面的部分培养液丢弃，加入新鲜培养液。
传代：
1、先将细胞吹打起来，使所有细胞悬浮，收集细胞于离心管，800rpm,10min，弃去培养液，用新鲜培养液重悬，分瓶补足培养液，培养；
2、将细胞吹打下来，直接分瓶扩大培养（比例可达到1：10），各瓶中补足新鲜营养液；
以上是我迄今看到的一些方法，请高手指点，哪种方法最适合？
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本实验室单抗做的比较多，常用的方法是：
1、融合前刚复苏的SP2/0细胞不经过离心（主要是避免细胞经离心有所损伤，造成生长不良或死亡）直接加入新鲜培养液培养；
2、隔天早上换液三分之一，中午再根据细胞密度情况一传二或一传三；
3、注意传代培养也没有经过离心，直接原瓶重悬扩大培养，频繁换液容易造成细胞饲养环境改变太大，因为细胞自身会分泌促生长因子，频繁换液也可能造成细胞分泌抑生长因子，导致细胞生长缓慢或不良甚至死亡；
4、换液：最多是选择半换液或三分之一效果较好，几种换液方法我做过比较还是这种方法细胞长的比较好，不知对你是否适用？
