细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]骨髓瘤细胞sp20的生长特点?

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[求助]骨髓瘤细胞sp20的生长特点?

兔唇[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79677
精华 0
积分 224
帖子 187
信誉分 100
可用分 1676
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-14
状态 离线
1
 

[求助]骨髓瘤细胞sp20的生长特点?




小弟刚开始养小鼠骨髓瘤细胞sp20,对其生长特性开不了解,那位战友知道sp20从复苏到融合(我是做单抗的)的生长各阶段的特点及传代换液等事项请不吝赐教! 谢谢!!
顶部
hold住[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75093
精华 0
积分 566
帖子 832
信誉分 100
可用分 4962
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
2
 

对这个细胞,首先是贴壁性不强,用弯头吸管可以轻松的将细胞吹下来。
细胞的培养,培养基使用1640就可以了,不过要添加葡萄糖,丙酮酸钠可加也可不加,b-巯基乙醇也是可选项。PH要调得略低点7.0,用HEPES进行调节。当然要无菌过滤。生长迅速,2-3可以传代,1:3传代是没有问题的。杂交瘤比较脆弱,生长的能力,速度等不及单身的SP2/0,两者之间,在同一个孔内,存在生存空间的竞争。往往是单身的厉害。从复苏到融合,这仅仅是实验的开头,以后的实验还比较长,融合后7-10天可以检测细胞的上清,发现阳性要及时克隆,有限稀释法。但这一步走容易丢失阳性克隆,有一点运气。不过比彩票的中浆要高的多。随后要2-4次克隆,最后的ELISA检测结果应是100%阳性,OD值相同,才算是一株。否则应当继续克隆下去。这个过程会延续3个月左右,期间如果发生细菌、支原体、真菌污染,则一切都是0。必须从头来。饲养层的制备是比较重要的。对96孔扳的观察是融合后每天必须的,请准备好盐药水,长时间的看10块或以上的培养板,眼睛有时后会看不清东西。还有就是再融合后,养小鼠,冻存细胞,换液,测3快以上的96孔ELISA版,是常规,是对身体和心理的巨大考验,最好是2人合作。
顶部
ritou1985[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77664
精华 0
积分 644
帖子 948
信誉分 100
可用分 5596
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
3
 

复苏的时候培养液一定要偏酸一点,大概6.9左右,一旦传代之后培养液PH变化大一点都没问题。
顶部
33号[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74277
精华 0
积分 549
帖子 757
信誉分 100
可用分 4611
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-9
状态 离线
4
 
各位大侠:
请问小鼠骨髓瘤细胞sp2/0及杂交瘤细胞培养液C-DMEM中可以添加什么促贴壁、生长分裂及稳定pH的因子? 谢谢!
顶部
yes4[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77377
精华 0
积分 764
帖子 1145
信誉分 101
可用分 6575
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
5
 

养的时候,不要等培养液发黄。换液的时候,我一般不离心,弃去原来的培养液后,用新鲜的培养液吹起,再分瓶,效果不错的,一般不用另加什么。
顶部
兔唇[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79677
精华 0
积分 224
帖子 187
信誉分 100
可用分 1676
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-14
状态 离线
6
 

谢谢了,你的质料对我非常有用.
顶部
101010[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75120
精华 0
积分 517
帖子 734
信誉分 100
可用分 4490
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
7
 

请问sp20可以用来建立小鼠多发性骨髓瘤的模型吗?成瘤性好吗?谢谢!
顶部
ending[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76092
精华 0
积分 771
帖子 1242
信誉分 100
可用分 6981
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
8
 

请问北京哪里有卖balb/c的骨髓瘤细胞sp20的?
顶部
66小飞侠[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75376
精华 0
积分 466
帖子 651
信誉分 100
可用分 4008
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
9
 

协和基础所细胞中心就有SP2/0
顶部
TAT[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74236
精华 0
积分 507
帖子 694
信誉分 100
可用分 4298
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-8
状态 离线
10
 

请问为什么在普通的1640完培里面要添加葡萄糖?
我们的杂交瘤细胞近来长的倒是不错,但是就是融合率很低,不知道什么原因?
顶部