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1.我肯定是按照试剂说明书上推荐的程序操作的,严格操作。
2.我们这其他实验室也做过,一样的试剂,一样的细胞,比我的效果要好。
3.细胞状态的话,不敢保证非常好,因为我也不知道MDA-MB-231这个细胞在非常好的状态下是什么样子的。但是我感觉,MDA-MB-231这个细胞,为什么总是在显微镜下能看到在细胞上面有许多黑点儿?? 是我的细胞有问题,还是这个细胞天生就有黑点儿?
4.我没有观察过24h,48h后细胞的状态。因为我根据试剂盒说明书上推荐,4~8h后就可以检测,但是,我征求了其他人的意见,知道可以等细胞长到48h后再收集,这样细胞数量会多一些,而且,保证转进去的基因正常表达。
5.质粒用天跟的无内毒素质粒大提试剂盒,大约在6个月前提的,一直保存于-20冰箱中,冻容少于5次。