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标题:[求助]细胞缺氧模型的方法

了了[使用道具]
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发表于 2012-3-18 08:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞缺氧模型的方法




我是一个新手，准备做细胞缺氧的模型，除了物理性性缺氧的模型和用氯化钴化学诱导细胞缺氧外，还有没有其他更好的办法？因为物理性更符合体内的情况，但是成本比较高。还有看到文献用罗丹明123来模拟缺氧的，这个原理是是什么？请DXY的战友们给点小弟一点建议，谢谢
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发表于 2012-3-18 08:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做的是心肌细胞的缺氧复氧模型，我用的是缺氧复氧培养箱，就是直接通氮气来缺氧，然后再通氧气来复氧。
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-3-18 08:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还有一种方法：可以用液体石蜡造缺氧模型。具体方法是将液体石蜡高温高压灭菌(同普通液体灭菌一样，石蜡不会分解)，冷却。然后将石蜡均匀地覆盖在细胞培养液的表面，大概形成0.5mm左右的一层薄膜，将细胞培养板水平放置，使石蜡层覆盖在培养液表面即可。因为氧气不溶解于石蜡，可以起到隔绝氧气的作用，一般24小时即可发现细胞坏死或凋亡。复氧时，吸去表面的石蜡层即可。
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发表于 2012-3-18 08:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有一个问题是那个CO2能不能通过石蜡，我是做肿瘤细胞缺氧后的生物学行为变化，还有没有其他的办法，各位拜托了
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ending[使用道具]
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发表于 2012-3-18 08:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那边有个帖子里说了几个缺氧的简易装置，很不错，我也用过的，心肌缺血，效果还是很好！
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xueyouzhang[使用道具]
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发表于 2012-3-18 08:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果没有低氧培养箱, 可以用干燥器制作一个缺氧装置, 用凡士林密封,
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发表于 2012-3-18 08:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #6 xueyouzhang 的帖子

哪里有几个缺氧的简易装置，能不能说一下具体的位子，谢谢
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发表于 2012-3-18 08:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是用CO2孵箱改装而成，接N2,CO2两个气体入口，内置一氧分压探头，保证孵箱内O2浓度<1%,CO2浓度调节保持在5%，模拟缺氧环境。

另外，你所说的“将石蜡均匀地覆盖在细胞培养液的表面，大概形成0.5mm左右的一层薄膜，将细胞培养板水平放置，使石蜡层覆盖在培养液表面即可”，怎样将石蜡覆盖？是液体的石蜡还是固体的？如是液体，温度肯定高于37度，对细胞难道没有损伤？另外密闭以后，培养基的PH如何调节？
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KGZ564[使用道具]
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发表于 2012-3-18 08:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果我需要缺氧后收集培养液，石蜡能不能去掉呢？
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KGZ564[使用道具]
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发表于 2012-3-18 08:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

另外液体石蜡本身对细胞生长有没有影响，如果缺氧24h后细胞凋亡，到底是缺氧引起的呢还是液体石蜡本身的化学刺激引起的？谁说得清？我觉得用化学药物诱导缺氧都存在这个问题，有没有两全其美的方法，既简便又有意义
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