小中大血小板的分离
方法I 一 试剂与器材
1 ACD(1.5％枸橼酸，2.5％枸橼酸钠，2％葡萄糖)
2 Sepharose 2B凝胶
3血小板缓冲液(Glucose 5.5 mmol/L、Tris 15 mmol/L、NaCl 0.14 mmol/L，pH 7.4)
二 操作步骤
1 抽取20 ml血用ACD(1.5％枸橼酸，2.5％枸橼酸钠，2％葡萄糖)以6:1比例抗凝，立即混匀，待进行凝胶过滤分离血小板。
2 血小板分离及凝胶过滤：ACD抗凝血于1 000 r/min离心10分钟，上清液为富血小板血浆(PRP)，PRP经Sepharose 2B凝胶过滤得静止血小板。
3 用血小板缓冲液(Glucose 5.5 mmol/L、Tris 15 mmol/L、NaCl 0.14 mmol/L，pH 7.4)调血小板浓度为1×109/ml。
方法II
一 试剂与器材
试剂盒（上海太阳生物技术公司）
1 抗凝液
2 试剂A
3 10×洗涤液
4稀释液
二 操作步骤
1 将抗凝剂用50ml蒸馏水溶解。将试剂A用200ml蒸馏水溶解。将浓洗涤液与蒸馏水按1:9稀释。
2 静脉取血，置于含有1/10体积抗凝液的离心管中（0.5ml抗凝液＋4.5ml静脉血），800rpm离心15min，吸取上层液（富血小板血浆，PRP），置于另一离心管中，3000rpm离心10min,弃去上层液，得血小板沉淀。
3 加少量的试剂A至血小板沉淀中，用吸管将沉淀吹散后加入试剂A至2ml,静置10min，3000rpm离心10分钟，弃上清液。
4 加少量的洗涤液至上述沉淀中，用吸管将沉淀吹散后加入洗涤液至5ml,3000rpm离心10分钟，重复四次，弃上清液，最后一次将试管倒置，沥干。
5 加1ml的稀释液到上述沉淀中，用吸管将沉淀吹散后，进行血小板计数，加入稀释液调节血小板计数为2×106／ml。
