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标题:[讨论帖]免疫细胞荧光图象重叠:达到激光共聚焦效果

vvmmoy[使用道具]
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[讨论帖]免疫细胞荧光图象重叠:达到激光共聚焦效果


红色Cy3标记


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vvmmoy[使用道具]
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兰色Hoechest33258 染核


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vvmmoy[使用道具]
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叠加图象


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u234[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 vvmmoy 于 2012-3-18 12:59 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

红色Cy3标记  

有红色与绿色merge出来的黄色
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园丁##[使用道具]
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好象未见类似帖子,我还是请教国外同事才知道这个方法的。
希望此帖子对没有激光共聚焦显微镜的群友有帮助
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园丁##[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 u234 于 2012-3-18 13:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')



有红色与绿色merge出来的黄色

什么意思,不明白。
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u234[使用道具]
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回复 #6 园丁## 的帖子

我看到照片里有的细胞中见黄色的部分,所以有此一问?
是Cy3标记本身就可以出现这现象吗?
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园丁##[使用道具]
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是荧光太强的缘故(二抗浓度加高了),将荧光强度衰减后,就见不到了黄的了
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u234[使用道具]
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哦。
那若同时另外一个标以绿色的荧光或是(E)GFP的话,很容易出现假的colocolization了
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园丁##[使用道具]
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也可能是一抗浓度加高了,总之背景太深
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