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标题:[求助]JC-1分析结果求助

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发表于 2012-3-20 12:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]JC-1分析结果求助




各位大虾们，小弟来求教。我做了流式，利用JC-1染色分析某种细胞的线粒体膜电位受损情况。结果让我很困惑。跟书上说的完全不一样啊。是不是我参数设置有问题？上流式时比较匆忙，有个老师帮***作。他也没有说清楚到底是什么原理。


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2012-3-20 12:42
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发表于 2012-3-20 12:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你分析的是什么细胞？
做的什么处理？
标记的是哪些东西？
阴性对照图呢？
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发表于 2012-3-20 12:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

分析的是癌细胞，加了药物刺激。做的是JC-1染色。没有做阴性对照，做了阳性对照。上面那张是正常组图。
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发表于 2012-3-20 12:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是我按试剂盒说明书里做的阳性对照结果。


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发表于 2012-3-20 12:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这张是我加药最高浓度的结果。


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 小中大

流式那的老师说，看象限里，Q2是正常细胞，Q4里是线粒体膜电位变化的细胞。这样看是对的么？如果我要分析结果。是不是把Q2:Q4的比值给做个柱形变化图就可以了？
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发表于 2012-3-20 12:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
会不会是组别弄错了？
再做一次试试吧！
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 小中大
流式那的老师说，看象限里，Q2是正常细胞，Q4里是线粒体膜电位变化的细胞。这样看是对的么？如果我要分析结果。是不是把Q2:Q4的比值给做个柱形变化图就可以了？

——————————————————————————————————————————

不是这样的，这时不要用比例值，而应该用平均荧光强度。
用FL2的平均荧光强度值/FL1的平均荧光强度值评价线粒体损伤情况，值越高，损伤越利害。
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发表于 2012-3-20 12:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 66+77 于 2012-3-20 12:44 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
流式那的老师说，看象限里，Q2是正常细胞，Q4里是线粒体膜电位变化的细胞。这样看是对的么？如果我要分析结果。是不是把Q2:Q4的比值给做个柱形变化图就可以了？

————————————————————————————— ...


FL2和FL1?我这里有的数据是 PI-A，和FITC-A的MEAN值。
是不是这样算也行的？
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发表于 2012-3-20 12:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
FL1就是第一荧光通道，就是你的FITC通道。
FL2就是第二荧光通道，应该就是你的PI通道。
平均荧光强度就是通道的Mean值。
看你的图细胞没有明显的阴阳性区分，最好不要用阳性比例作为你的结果，最好用平均荧光强度。
而且JC-1染色一般也是要求结果是FL1和FL2之间平均荧光强度的比值。
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