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标题: [求助]细胞瓶底有贴壁小亮点 [打印本页]

作者: u234 时间: 2012-3-24 12:59 标题: [求助]细胞瓶底有贴壁小亮点

最近养细胞，刚复苏和最开始的2、3代状态挺好的，再传代就开始有点漂，并且有贴壁的小亮圆点和细胞一起长。后来细胞不漂了，还是有很密的小亮点。很亮，并且边缘规则。如何避免这种情况呢？还能消除吗？
还有一个问题：什么是细胞沙化？像我养的细胞的情况是细胞沙化吗？

作者: u234 时间: 2012-3-24 13:00

应该不是细菌，培养基不是很快变黄，并且小亮点是贴壁的，不会动，但能消化下来。

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作者: 缘yuan 时间: 2012-3-24 13:01

见过的类似情况要么是真菌污染要么是细胞凋亡太多形成的凋亡小体
要是小亮点连成串珠状肯定是真菌污染，要是散开大小不一有可能是凋亡小体，一般细菌污染看不到小亮点，细菌没那么大大肠杆菌镜下看起来就是些很微小的黑丝

作者: 缘yuan 时间: 2012-3-24 13:02

如果你的图片上显示的连在一起那种小点不是你的细胞，那肯定是真菌污染了真菌污染很麻烦双抗搞不的

作者: dragonkilly 时间: 2012-3-24 13:02

lz，我也遇到了和你类似的情况~
复苏了以前冻存的细胞，刚开始状态还不错，等传了一代后就出问题了，生长速度很缓慢，部分地方由于细胞死亡而形成空白，培养液表面漂浮了很多透明远点，但是好像不是成念珠连在一起。
求问达人们到底是什么情况
晚上有时间了上几张图~

作者: wu11998866 时间: 2012-3-24 13:03

感觉小亮点是贴壁的，晃动培养瓶小亮点不会跟着动，能够被消化下来，不连在一起，是散开的。我们养了5种细胞，其中2种出现了这种情况，其他的还一直没事。

作者: wu11998866 时间: 2012-3-24 13:04

连在一起、大的是SW620细胞，背景中很多小的亮点不知是咋回事。

作者: ha111 时间: 2012-3-24 13:04

我以前养细胞也出现过这种情况，想想是不是培养液使用太久，反复冻溶有害物质就出来了。培养液配制越新越好，一般使用不要超过一周

作者: guagua 时间: 2012-3-24 13:05

应该是污染了，我以前也养过这样的。冻存前是好的，复苏后就出现污染的情况。

作者: 小螺号 时间: 2012-3-24 13:05

你就多养几天，细菌污染一般三天培养基就会变得混浊，而且在显微镜下可以观察到细菌在动。常见的真菌一般要比你养的细胞小，像真菌白色念珠球菌和你描述的亮点应该差不多大小，刚开始是小棒状或是椭圆的，分裂时会拉长，串状..,且静止不动。
如果比较分散，如楼上的一位兄弟所说，是凋亡小体，反光度很高，细胞凋亡是程序性死亡，如果你里面有巨噬细胞的话，可以看到小亮点会着附在巨噬细胞上，板底干净，各细胞生长良好。
细胞凋亡早期会形成一些“芽体”，是内质网不断扩张并与胞膜融合，形成膜表面的芽状突起，称为出芽，比后期形成的凋亡小体要大，所以你最好看看有没有个别介于细胞和小亮点之间的“亮点”。

作者: 3648755 时间: 2012-3-24 13:07

细菌污染的话，培养液会很快变浑变黄，楼主的细胞不排除支原体感染

作者: 小螺号 时间: 2012-3-24 13:09

是啊，且支原体污染一般很难看到培养基变浑浊，但是细胞会慢慢的死去。支原体光学显微镜下也很难看到，支原体太小了，一般染色才能确定。

作者: 阿敏 时间: 2012-3-24 13:09

建议楼主换培养液试下，看看是否还有这样的小亮点。之前请我们养的细胞也出现过类似的情况，换了几次培养液以后就慢慢的消失，具体的原因还不是很清楚。

作者: fei1226com 时间: 2012-3-24 13:10

这个图片显示细胞状态不太正常，我养过sw620和sw480细胞，前者是有部分呈圆形状态，但是无论如何也应该有贴壁伸展状态的细胞，图片里好像看不见，另外，图片中有些小圆点肯定是不正常状态，我养的这个细胞没见过这类状况，实验人员最好重新复苏细胞再试试。

作者: 小螺号 时间: 2012-3-24 13:11

很感谢战友们的热心解答！小亮点的反光度很高，分散，很象焉知水寒所说的凋亡小体。应该如何避免呢？等检验一下支原体。但是我们5株细胞都是一起传代的呀，有可能只有2株细胞感染，其他的没事吗？

作者: jrwyyplt 时间: 2012-3-24 13:11

是不是酵母污染啊

作者: remenb 时间: 2012-3-24 13:12

细胞沙化是什么？有高人回答吗？
我养人的BMSCs,如果志愿者的年龄很大，分出的细胞养了一段时间后就会出现细胞形态很宽大，细胞之间的分界不是很明显，镜下见细胞内似乎有小颗粒，开始以为是污染了，但是接着养也不会有培养基变黄灯现象。细胞生长较慢。
养鼠的BMSCs时出现过开始时很好，后来出现类似的情况。有人说是细胞老化，也没找到细胞老化是怎么一回事。
楼主提到沙化，不知道是不是我遇到的这种情况，借楼主宝地，盼高人解答。

作者: 33号 时间: 2012-3-24 13:13

你用的培养平板还是克隆瓶？

作者: any333 时间: 2012-3-24 13:14

我觉得最可能还是支原体感染。

支原体感染的细胞最后看起来都差不多。晚期凋亡或死亡的样子。细胞间很多黑点，调焦过程中也可以显示成亮点。

作者: remenb 时间: 2012-3-24 13:14

我养的细胞也有这种问题，组织块旁边总有很多亮亮的小点，有的培养瓶里组织块还能爬出细胞，有的完全长不出细胞。换液后仍然有，不知道什么原因。

作者: eric930 时间: 2012-3-24 13:15

瞧着像是真菌感染了，它是浮于贴壁细胞之上的。可以多观察几日，培养液是否变浑，或者贴壁细胞的变化。请在三天，再扫个片，传上来，告诉我们结果。

作者: eric930 时间: 2012-3-24 13:16

另外，是不是水珠？培养皿盖上的？

作者: 17835650657 时间: 2022-8-4 16:44

我的细胞也是这样，加诱导之前长得特别好，但是诱导后就这样了，而且诱导的所有东西都是我新配的，都是新的，人都蒙了，这是因为什么呀

作者: 17835650657 时间: 2022-8-4 16:45

我的细胞也是这样，加诱导之前长得特别好，但是诱导后就这样了，而且诱导的所有东西都是我新配的，都是新的，人都蒙了，这是因为什么呀

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