分析测试百科

标题: 做尾静脉注射，标准曲线范围该如何确定？ [打印本页]

作者: zhllo001 时间: 2012-3-24 14:01 标题: 做尾静脉注射，标准曲线范围该如何确定？

正在做的药，需要做尾静脉注射，大概浓度范围是5到50000ng，标准曲线范围该如何确定？
有人建议不能做这么宽的范围，但是又不知道再怎么往下做了

作者: 感悟人生 时间: 2012-3-25 13:11

这么宽的范围，线性不一定好做。但要是这些检测浓度是你检测中必须要用到的话，那就得做这么大。

作者: michael_b_rex 时间: 2012-3-25 13:20

线性跨度太大，建议两条标曲，低浓度和高浓度范围各一条标曲，准确性会好些

作者: duxin_30 时间: 2012-3-25 13:29

看楼主样品浓度跨度1w倍，很难只用1条标曲完成，需将低浓度做一条，相对较高浓度再做一条。低浓度可以加权：1/c或1/c/c。

作者: fence-straddler 时间: 2012-3-25 13:30 标题: 回复 #1 zhllo001 的帖子

线性范围的宽度是仪器限制了的，你可以最大可能地去尝试一下，确定了线性范围，过浓的样品溶液可以通过稀释囊括进去，过稀的就只有想办法浓缩了。

作者: sacred 时间: 2012-3-25 13:37

把握一个原则，串级质谱可以改成单级质谱模式用，测定的浓度可以高些，一般串级质谱进样量最好不过微克级别，单级的模式可以扩大十倍。
另外做个血浆样品的稀释准确度，对于个别较高的点可以稀释测定。看你的范围这么宽泛，知道药物在体内消除应该很快，指导原则要求不一定非要药代动力学考察到那么低的浓度，倒是可以做到Cmax的 1/10～1/20，反映的一些参数就已经比较有意义了。

关于做两条标线的情况，也可以，但是结合实验室情况，不要给串级质谱强行进大浓度的，另外设计的两条标准曲线之间必须有交叉点，例如5～1000，500～50000，考察质控点的时候设计一个800，上下都能用，考察两个标线。

作者: zhllo001 时间: 2012-3-26 14:53

血浆样品的稀释准确度应该怎么做啊
那么我可以最低设到10ng就行么，做个10到5000左右的，再把高于5000的血浆稀释就行么

是不是就要做两套方法学了？

作者: woaifou 时间: 2012-3-27 11:41

你要是做两条标曲差不多就是两套方法学了。血浆稀释准确度的话你可以这样做，比较浪费血浆的做法是：（假如你原来方法是1mL血浆，加50微升QC样品）配制QC高标准溶液以及2倍QC高浓度的标准溶液，取1mL血浆，加50微升QC高标准溶液或者2倍QC高标准溶液，混匀后取出525微升，加入0.5mL空白血浆，补加25微升溶解标准溶液的溶剂，其它按照你血浆样品处理方法处理，这样你的两个浓度都被稀释了2倍，也就都在你的曲线范围内了，但是这样也只是把你的标曲扩大到2倍QC高的浓度。不浪费的做法就是1mL血浆加25微升标准溶液，补加25微升甲醇，其它同法处理了。实际生物样本做的时候就取一半的血浆，补加一半空白血浆，其它同你血浆样品处理方法了。

作者: xiongwei397 时间: 2012-3-27 13:40

我们曾经做过这么宽的范围，不过这需要看你的质谱能不能进这么大浓度的，50000ng浓度太大了吧，我们实验室的质谱最大也就能进5000ng的吧，浓度太大经常会雾化不好的，导致高点上不去，就是高浓度点跟低浓度点不成线性了，你浓度大的点可以考虑稀释后再测的，跟着做稀释QC就行了

作者: zhllo001 时间: 2012-3-27 13:41

这么宽是不是不容易做直呢，而且该怎么设计浓度点呢

欢迎光临分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)