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标题: [求助]细胞被污染能支持多久？ [打印本页]

作者: woshituzhu 时间: 2012-4-13 12:44 标题: [求助]细胞被污染能支持多久？

我养的L-02肝细胞，昨天传代，今天发现全部被白色念珠菌感染，我个人刚好感冒，有关系吗？？然后想用两大霉素至治疗，但没有现货，得等3到4天，我的细胞每天换液和用PBS冲洗，能支持3天吗？？

作者: rxcc33 时间: 2012-4-13 12:45

感冒是病毒感染，白念是真菌，不是一回事啦！
庆大霉素对白念没啥效果，甭指望那个

作者: vcve 时间: 2012-4-13 12:45

先频繁洗吧，然后加入两性霉素B， 2.5ug/ml，起始可以加稍高浓度；

如果有冻存的细胞种子，还是把这株细胞丢掉吧，因为即使用了药，也很难保证杀干净的。

作者: woshituzhu 时间: 2012-4-13 12:46

冻存的种子不多，所以不舍得丢弃。最近不知道为什么，养着养着就自己污染了，传完代后头两天都没有事，第三天就浑浊了，什么都没有动过，超级崩溃！

作者: vcve 时间: 2012-4-13 12:46

第三天污染的是真菌啊用药是没有作用的建议把培液验下菌看看三天会不会污染然后在养

作者: vcve 时间: 2012-4-13 12:47

冻存的种子不多，所以不舍得丢弃。最近不知道为什么，养着养着就自己污染了，传完代后头两天都没有事，第三天就浑浊了，什么都没有动过，超级崩溃！

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这个问题只能希望你注意无菌观念了，我用培养皿养细胞，连续养1个多月都很少污染的。

作者: is2011 时间: 2012-4-13 12:47

这个问题我以前也遇到过,如果真是被白色念珠菌污染,我想是没有什么方法能有效清除了,我以前几乎把市面上所有的能用的认为好的抗生素都用了(包括一种进口的超级抗生素)也没保住被污染的细胞,每天用PBS冲洗,早晚各一次,人也受罪,细胞也受罪,前后折腾了近2个月还是不行,建议楼主还是不要浪费时间了,重新换新的细胞或细胞室进行彻底消毒.

作者: woshituzhu 时间: 2012-4-13 12:48

细胞室消毒，除了新洁尔灭和紫外消毒外，谁试过甲醛熏蒸，改怎么操作，会把培养箱里的细胞熏死吗？？

作者: okhaha 时间: 2012-4-13 12:49

甲醛熏蒸的时候,所有细胞培养箱最好停用,把细胞都转移到别的实验室去养,转帖步骤如下
①按照甲醛（40%）10毫升／立方米、高锰酸钾5克／立方米计算用量。不同情况下，用量有所不同，但比例为2：1。

②盛药容器要大、耐热、耐腐蚀：一般用陶瓷或玻璃容器，因为高锰酸钾和甲醛都具有腐蚀性，且混合后反应剧烈，释放热量。

③房间要密闭：这样熏蒸效果才会好。

④容器应尽量靠近门，以便操作人员迅速撤离；先将温水倒入容器内，后加入高锰酸钾，搅拌均匀；再加入甲醛；加入甲醛后人立即离开，密闭房间。
注意顺序：是将甲醛倒入高锰酸钾溶液内。

⑤消毒时间一般为20-30分钟。

⑥消毒后要打开门窗通风换气。

这里说的甲醛就是40%的甲醛溶液，也就是福尔马林，一般包装上写的是37%。

作者: okhaha 时间: 2012-4-13 12:49

消毒后可放入25%氨水蒸发中和刺激气味。氨水用量为所用甲醛水溶液的一半，时间为30分钟。甲醛气体毒性非常强，所以操作时一定需带上防毒面具

作者: hold住 时间: 2012-4-13 12:50

个人建议如果不是珍贵的独苗，还是扔了吧，染菌后的细胞系有什么变化谁也说不好，会不会变异，影响以后实验结果都是未知数，还是忍痛割了吧，时间越长越不能要

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