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标题: [求助]帮我看看是不是污染了 [打印本页]

作者: bohe221 时间: 2012-5-14 16:00 标题: [求助]帮我看看是不是污染了

培养基变的特别混浊，有白色的东西！会不会是悬浮细胞成团生长呢？
我养的是jurcat.

如果污染了怎么办好呢？
我昨天刚复苏，还加了联抗！而且我复苏了十几种其它都还好，应该不是培养基或者用的枪头什么的！

图片附件: 12104635.snap.jpg (2012-5-14 16:00, 67.01 KB) / 该附件被下载次数 2
http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=12057

作者: duoduo 时间: 2012-5-14 16:00

强，把图片都弄上来的，用什么拍的？

jurcat是贴壁还是悬浮细胞？

我养的B16F10（贴壁细胞）也出现这种情况，漂浮着浅黄色片状物，不知是不是霉菌污染？

作者: bohe221 时间: 2012-5-14 16:01

悬浮的。就是很浑浊的那种。
B16是黑色素瘤细胞吗？用什么培养基养的？胰酶消化多长时间呢？
过两天我也养这个细胞，长什么样子啊？

作者: remenb 时间: 2012-5-14 16:01

如果你是刚复苏的话，
应该不会有成团细胞的。
我养的是raw，觉得你好像污染了。
最后赶紧换液，因为你的悬浮细胞下面状况好像不错。
最后你能告诉我你用什么拍的照片啊？

作者: star#room 时间: 2012-5-14 16:02

应该是霉菌污染，前一阵子我们实验室从外面进来一株细胞跟lz的情况一样，最后导致整个培养箱细胞全部污染。整个实验室全面消毒。现在还在提心吊胆，不知道是否还有潜在污染源。

作者: zwsyrt 时间: 2012-5-14 16:02

我看不象是污染，成团的象是正常细胞聚集。
如果是污染，应该有污染物的成团聚集，我没看到，图片中有些成团的只有正常细胞。有些成团的有大量正常细胞，而有些东西看不太清楚，我感觉不是污染。

作者: XYZQ 时间: 2012-5-14 16:03

我觉得不象污染的

作者: 66小飞侠 时间: 2012-5-14 16:04

拍摄细胞图片，最简单的方法就是用数码相机对着倒置显微镜的镜头，对好焦，直接拍照就可以了！

作者: 66小飞侠 时间: 2012-5-14 16:04

我想应该是污染了，没有别的方法。你养的细胞株相对来讲很娇贵。应该注意加培养液的过程。

作者: shenkunjie 时间: 2012-5-14 16:05

同楼上的观点,我认为可以排除污染的可能。
总的来说细胞生长状态还可以。
复苏第二天细胞既有集落样增殖表现有点太快了些，一般新复苏的细胞都要经历对新培养环境的适应过程，这个时间就得一到两天，你提供的图片象复苏三天时的情况。如果时间上你提供的没有错的话，我分析原因是细胞冻存时消化分散的不彻底，造成冻存细胞中细胞团块多，或是复苏中细胞吹打不够，造成细胞复苏后出现增殖的假象。

作者: baidukk 时间: 2012-5-14 16:06

可能是细胞复苏得不好，比如复苏时间、温度等的控制不一致，所以同一批复苏的细胞有的好有的差
图中的细胞看起来像是聚集成团的死细胞。建议换液继续培养观察
不太像污染，如果是霉菌污染就显而易见，微生物污染高倍镜下会有很多活动的小点，我没接触过支原体污染，不过根据之前看的资料，这个应该也不是支原体的问题

作者: gmjghh 时间: 2012-5-14 16:07

按照LZ 的說法，以前我也遇見過，是不是復蘇第二天之后觀察時，發現培養液里有白色的渾濁物，輕輕搖晃培養瓶可以很明顯的看見白色渾濁物漂浮，鏡下觀，細胞狀態不好？建議檢查培養液狀態，如發現在傾倒培養液時，培養液變粘，則可考慮為雜菌污染。

作者: HPLC使者 时间: 2012-5-14 16:08

我看不象是污染，成团的象是正常细胞聚集。
如果是污染，应该有污染物的成团聚集，我没看到，图片中有些成团的只有正常细胞。有些成团的有大量正常细胞，而有些东西看不太清楚，我感觉不是污染。

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我养的是treg细胞好几个月了，原代的，每次都会有成团的现象，刚开始以为是没有催打开，可是细胞养老两天后拿出来一看，成团的更多，（应该不是污染的原因，我试很多次且很努力的不让污染了），实在不知道什么原因，真急啊，求教了。

作者: 987789 时间: 2012-5-14 16:08

我觉得是细胞太多，没有吹散，聚集成团了，然后就不贴壁了
黑色素瘤细胞特别娇贵，如果养满了，不及时传代，就会立刻都掉下来……
别的细胞如果长满了不传代，还可以再长一两天……

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