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[求助]细胞长得慢该如何处理
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作者:
taoshengyijiu
时间:
2012-5-21 16:00
标题:
[求助]细胞长得慢该如何处理
我养的是绒癌细胞,JAR,JEG-3,同时复苏后并在相同条件下培养22天了,JAR已经都传了四五代,而JEG才传了一代后至今一瓶培养瓶都还没爬满。请教了师姐说JEG本来生长较JAR慢,但进入状态后长起来还是挺快的,现在也不知到底什么原因,也不像污染,请问有什么办法能让此细胞长得快点呢
作者:
newway
时间:
2012-5-21 16:01
。。。。。。我想购买JAR细胞,如果你在广州的话,我想向你买。。。有关吧。。。
你可以提高血清浓度试试看。。。
作者:
taoshengyijiu
时间:
2012-5-21 16:01
QUOTE:
原帖由
newway
于 2012-5-21 16:01 发表
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。。。。。。我想购买JAR细胞,如果你在广州的话,我想向你买。。。有关吧。。。
你可以提高血清浓度试试看。。。
提高血清浓度?你有这方面的经验么??
作者:
newway
时间:
2012-5-21 16:02
标题:
回复 #3 taoshengyijiu 的帖子
是的,提高血清浓度可以促进细胞生长
作者:
taoshengyijiu
时间:
2012-5-21 16:02
标题:
回复 #4 newway 的帖子
哦,谢谢指教,不过我不在广州,我的细胞是导师以前实验购买的
作者:
newway
时间:
2012-5-21 16:03
唉,哪位在广州的朋友有养JAR细胞的。。。。求助啊!
我要买JAR细胞啊,要不然毕不了业啊!
顺便问一下,你能帮我问问你导师那时是在哪家公司买的吗?非常感谢!!!
作者:
taoshengyijiu
时间:
2012-5-21 16:03
标题:
回复 #6 newway 的帖子
中国科学院上海细胞所可以购买到
作者:
flower-201
时间:
2012-5-21 16:04
可以将血清浓度调到15%看看。
作者:
HP007
时间:
2012-5-21 16:04
你用的是新的培养瓶么?如果是,那细胞不适应也会涨得不好的!
还有就是你增加小牛血清的浓度,比如20%,不要对细胞太苛刻了!
作者:
一叶
时间:
2012-5-21 16:05
【个人经验总结,仅供参考】:
我已经养了一年细胞了,一些本来就长得慢的细胞株我也经常碰到,但超过十天左右传一次代就已经算慢了,像你现在碰到的这种情况都22天了还传不了实属罕见,我个人认为:
1.首先确定你这瓶细胞是否还属正常状态,确定这类细胞株一般培养特性(可搜索查阅相关文献是否真有长这么慢的?),确定没有污染或还有细胞活性(显微镜下严密观察有无菌丝、异常漂浮物、细胞有无成团、细胞突触情况、培养液颜色及细胞代谢情况等),如果不正常了建议弃掉重新养瓶新的试试(我个人感觉这瓶细胞应该不行了);
2.如果还是坚持认为可以或想再试试,可以:a.增加血清浓度,可增至20%以上试试;b.重新加谷胺酰胺(1ml加到100ml,尤其是培养液配制已经超过2周);c.可试着添加少许β巯基乙醇刺激试试;d.“原地消化”,即重新消化一下让它重新贴壁试试看看;
3. 检查培养环境(培养液、培养瓶、培养箱)有无异常;
4. 经上述试验还是不行,则回到第一条,强烈建议重新养;
以上纯属我个人体会,供你参考,祝你成功!
作者:
TAT
时间:
2012-5-21 16:06
一方面血清浓度提高,一方面可以消化后更换瓶子养,胰蛋白酶要少用,消化过度也会长很慢
作者:
小野花
时间:
2012-5-21 16:06
小牛血清浓度提高到20%,细胞长势要好些。
请问楼主,你的JAr细胞有没有出现成团生长的情况?
作者:
yueban-1147
时间:
2012-5-21 16:06
有,可能传代时没完全吹散也有关系,不过好像要完全吹成单个的也难
作者:
小糖块
时间:
2012-5-21 16:07
不知道jeg-3细胞有无成团生长性质,貌似绒癌3个细胞系均有这种性质。楼主养过bewo细胞么?
作者:
dog002
时间:
2012-5-21 16:07
不知道jeg-3细胞有无成团生长性质,貌似绒癌3个细胞系均有这种性质。楼主养过bewo细胞么?
作者:
dog002
时间:
2012-5-21 16:08
养过这个细胞,关键是要用胎牛血清培养,而且要用特级胎牛血清效果才能比较好,,不然生长很差
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