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标题: [求助]请养过PANC-1的战友们看看这样的细胞是否是被污染了？ [打印本页]

作者: 00无名指00 时间: 2012-5-30 11:31 标题: [求助]请养过PANC-1的战友们看看这样的细胞是否是被污染了？

最近在养PANC-1,第一次传代后细胞状态尚可，排列整齐，且生长较快，但第二次传代后，细胞状态不佳，每天都有大批衰老死亡细胞悬浮，贴壁细胞不见明显生长，且伸出细长突起，状似树根，失去原有的形态特征，但液体清亮，不浑浊。同样的液体养其他细胞未出现异常状况。不知这是否是被污染了？是什么污染的呢？真菌还是支原体或其他？请有经验的同志不吝赐教，不胜感激！

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作者: 00无名指00 时间: 2012-5-30 11:32

再看看这张！

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作者: 00无名指00 时间: 2012-5-30 11:32

这一张也是！

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作者: owanaka 时间: 2012-5-30 11:32

我没养过PANC，但在养其它细胞的过程中也会发现这样现象，可以考虑一下是否由局部细胞密度过大，导致细胞老化和悬浮。还有一种是正常现象，即在细胞分裂增殖过程中，新分裂出的细胞在原处如无空间生长，会迁移至别处，所以有时也会在瓶中观察到悬浮细胞。

作者: 00无名指00 时间: 2012-5-30 11:33

谢谢你的回复。但好像不是细胞过密，细胞很稀少，传代后一直不长，而且不断死亡，正常时应该形状很规则且饱满，可现在全变成树根样的，且慢慢在枯竭，细胞周边也似有小渣滓，没有细胞的地方也不透亮，而是模糊有雾似的。我怀疑是培养液的问题，难道是血清的规格不够，不是进口的？有过这方面经验的同志一定要多指教呀，现在每天看着细胞在慢慢衰竭，心急如焚，一筹莫展呀！

作者: 二丫头466 时间: 2012-5-30 11:33

不一定是污染，看起来不太像，但细胞状态肯定不正常，扔了吧。可能原因太多了，很难搞清楚啊

作者: 00无名指00 时间: 2012-5-30 11:33

真的没有好的办法了吗？太可惜了，有些舍不得呀，照顾了这么长时间，似乎好像还不是无药可救？但就是找不着原因。这样也很麻烦，不知道问题出在哪里，就不知道如何避免，如果新细胞再出现这样的问题可怎么办呀？

作者: XYZQ 时间: 2012-5-30 11:34

谢谢你的回复。但好像不是细胞过密，细胞很稀少，

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从你的PP看，空隙处是贴壁的细胞，所以细胞并不“稀少”。

你认为长的不好的细胞是没有完全爬开（或者是“收缩”）的细胞。

作者: yhz1973 时间: 2012-5-30 11:34

最近养的HUVEC细胞也出现这种情况，传代的细胞分装到3个瓶中，有1瓶细胞长成了这个样子，想来想去，怀疑是瓶子的问题，新瓶子装的细胞就没事。

作者: greenbee 时间: 2012-5-30 11:34

没养过这类细胞，但明显营养不够，可重新消化放置T25培养，可能会挽救回来。

作者: 00无名指00 时间: 2012-5-30 11:34

谢谢各位的指点！现在回想，最大的原因可能就是血清规格不行，之前用的国产血清，新的细胞用了进口血清之后基本不会出现这种情况，只有在换液不及时液体明显变酸之后，细胞才有这样的老化迹象。之前的细胞在大批老化飘起之后，残余的几个细胞经过进口血清的培养也慢慢长起来了，看来血清还是很关键的！
不管怎样，还是谢谢大家的帮助，希望这也能给后来者提个醒！

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