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标题: [求助]细胞污染?请各位指教 [打印本页]

作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:24 标题: [求助]细胞污染?请各位指教

我养的是A549,细胞在低倍下可见于细胞间隙一些黑色斑点,在高倍下可见一部分在做圆周运动.另外,细胞内可见很多颗粒.但细胞仍能生长,速度不慢.
上传一些图片,请大家帮忙看看,谢谢!

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作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:24

再发几张

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作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:27

视野中央的圆圈会是什么?污染吗?一瓶细胞内会看到不少

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作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:27

这两张视野中的杂物是什么?会是哪种污染?细胞液澄清,但肉眼可见细胞生长面上有白色斑点,为镜下所见的杂物

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作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:27

还有一张

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作者: star#room 时间: 2012-5-31 12:28

肉眼可见细胞生长面上有白色斑点,
高度是怀疑白色念珠菌污染。

作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:28

大家看看这个贴啊，似乎污染挺严重的，不知道是什么

作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:31

几天出现这情况的?细胞污染很快的!

作者: loli 时间: 2012-5-31 12:31

几天出现这情况的?细胞污染很快的!

作者: vera+ 时间: 2012-5-31 12:32

世界上根本没有什么黑X虫，传说而已。很可能是血清热灭活造成的蛋白质聚合物，取消热灭活看看吧。再说热灭活也是没有必要的。

作者: yysr238 时间: 2012-5-31 12:33

霉菌污染，100％

建议：丢弃你现在被污染的所有细胞

严格再次实验室消毒，

以前用的培养基重新过滤

实验中严格无菌操作

作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:33

谢谢大家给我的指正!
想再问一下,前面二张所示的也是霉菌污染吗?或是A549细胞传代次数多了本身就会如此?
第三张中间的圆圈会是什么?一瓶细胞中会出现不少.难道是霉菌污染的前兆?

作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:34

我用的是四季清的小牛血清,没有进行热灭活处理,从-20度拿出4度融化后直接用的

作者: yysr238 时间: 2012-5-31 12:34

我也搞出来过传说的那个“黑X虫”，很传神的名字啊，在20X10的镜下，看到密密麻麻的黑线状的东西，长度跟半个细胞差不多，还在原地微微的蠕动。我不相信那是虫子，查了Hyclone的网站，说是因为热灭活。但是我从来没有热灭活过，只是那次溶解血清时太匆忙，直接从-20度放到了37度解冻而已。此前此后再也没有目睹“黑X虫”的尊容了。很多人都说自己污染了，是很恐怖的“黑胶/焦/虫”，连名字都没弄准呢。最搞笑的是那个军事医学科学院肿瘤研究所肿瘤生物学检测中心，竟然研制成功杀“黑X虫”培养基。（cuturl('http://www.cicams.ac.cn/marker/production3.htm#text6')）如果是黑色的线装或点状污染，在热灭活血清的情况下，很可能是蛋白质的聚合物。参见cuturl('http://www.perbio.com.cn/Hyclone/page/note.htm')。楼主说是白色斑点，而且也没有热灭活，不考虑“黑X虫”污染。

作者: yysr238 时间: 2012-5-31 12:35

lz发的照片太小了，看不清啊。搞几个高倍的吧。

作者: sunnyB 时间: 2012-5-31 12:35

我的细胞也有很多颗粒，长满了的瓶子里象沙子一般实在不知道是怎么回事啊请各位赐教啊

作者: 131415 时间: 2012-5-31 12:36

霉菌污染，100％

作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:36

为什么是霉菌污染阿？如果是霉菌污染应该可以看到菌丝的阿

作者: kswl870 时间: 2012-5-31 12:37

应该是霉菌污染,我的就是这样死了的.会越来越多

作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:37

我的都从31号放到4号细胞都没有死，我在想颗粒是不是因为营养不足阿。而且很多老师看了细胞都说不像霉菌污染阿我真的不知道怎么弄了，请问细胞如果被霉菌污染多少天可以看出来呢

作者: Ao7 时间: 2012-5-31 12:38

最后一张中间的那个好象是坏死细胞的融合,我也觉得不是霉菌污染,我的也是传几代就出现很多黑点,越长越慢,几天就都是絮状物了,还是放弃好了

作者: ladyhuahua 时间: 2012-5-31 12:38

这如果是霉菌的话,怎么看不到菌丝呢?!
我的细胞也出现这样的问题

作者: okhaha 时间: 2012-5-31 12:39

这种污染镜下看象一层黄褐色的绒毛状物附在细胞上
我的第四张图偏左下方的空处原来长满了这种东西,几天之后,那一块全空缺了
这种污染似乎长的不快,从发现开始,三四天一瓶细胞还只有一处有这种状况,细胞液不浑,细胞还可以长

作者: remenb 时间: 2012-5-31 12:40

这两张视野中的杂物是什么?会是哪种污染?细胞液澄清,但肉眼可见细胞生长面上有白色斑点,为镜下所见的杂物
做了很长时间的细胞培养了，认为你的白色斑点是霉菌污染，可是你的图片上又不象。看你第一张图片和你的－－－细胞在低倍下可见于细胞间隙一些黑色斑点,在高倍下可见一部分在做圆周运动.另外,细胞内可见很多颗粒.但细胞仍能生长,速度不慢.－－认为是细菌污染，但是低倍的光学显微镜看不出具体是球菌还是杆菌还是... 我发张霉菌的照片吧400倍的，我曾经的污染照片。

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作者: zhezhe 时间: 2012-5-31 12:40

很典型的线状结构。肉眼看到的是白色团块。

作者: 缘yuan 时间: 2012-5-31 12:40

我的细胞也出现了类似的污染，肉眼可见白色的点状物，不贴壁，显微镜下可见成簇的，像开花似的。

作者: qumm1985 时间: 2012-5-31 12:41

我的也出现过这种情况，传了一带黑店越来越多都扔掉了．请问那位知道细胞被污染了还有什么补救措施吗？我的细胞很贵，也没有冻存的了．惨呀

作者: 大白菜 时间: 2012-5-31 12:42

我前两天也出现过这种情况，和第五张图片一样，我养的是7901和7404都被感染了。后来把原先配制的含血清1640培养液进行无菌试验，结果第二天在高倍镜下发现许多白色蠕动状的小虫。低倍镜下看到与第五张图片一样的黄色絮状小块。也不知道是什么东西！

作者: dog002 时间: 2012-5-31 12:43

PBS多洗几遍，换新鲜培养基（可以加大抗生素的量），看看运气了

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