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标题: [求助]抗性筛选 [打印本页]

作者: superboy 时间: 2012-6-24 16:02 标题: [求助]抗性筛选

看了好多文章，都是用G418来筛选转染后的细胞，但所用载体都为新霉素抗性，我选的是卡钠抗性的载体，可以用卡钠来筛选稳定的细胞吗？请指教！谢谢

作者: tianmei001 时间: 2012-6-24 16:03

兄弟，G418、Zerocin、潮霉素为真核抗生素，氨卞、卡那霉素等为原核抗生素，一般情况下做原核表达的载体上只有原核抗生素抗性基因，而在真核表达载体上有的只有真核抗生素抗性基因，有的载体原核真核抗性基因都有，做真核细胞的稳定株的筛选只能用真核抗生素，你把两个抗生素搞混了。

作者: junjie05 时间: 2012-6-24 16:03

奥原来是这样，小弟是研一的刚开始做实验，那只能换载体了？如果用原来载体是不是筛选不出来？嘿嘿……知识很浅敬请指教

作者: u234 时间: 2012-6-24 16:03

奥原来是这样，小弟是研一的刚开始做实验，那只能换载体了？如果用原来载体是不是筛选不出来？嘿嘿……知识很浅敬请指教

作者: vera+ 时间: 2012-6-24 16:04

那要看你原来的载体在真核中到底是什么抗性的啊，你要先搞清楚这个。
细胞人说的没错。

作者: jujuba 时间: 2012-6-24 16:04

我的在提示卡钠抗性的，PVAX1

作者: 831226 时间: 2012-6-24 16:04

卡那抗性是指在原核中的，要搞清楚在真核中的是什么抗性。好好看看说明书。

作者: superboy 时间: 2012-6-24 16:05

我看了说明书上确实是卡钠抗性，现在我都糊涂了哈哈

作者: superboy 时间: 2012-6-24 16:05

我这个载体本身就是真核表达载体啊？

作者: gemei0115 时间: 2012-6-24 16:06

卡那抗性是你的载体其中的一个特性，它肯定还有真核抗性的，你再仔细看看说明书

作者: superboy 时间: 2012-6-24 16:06

谢谢大家，PVAX1最适合用来左核酸疫苗，它缺乏抗性筛选基因，所以我要换载体了，前面连上的白费了，又要从新起步了哈…

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