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标题: [求助]肝细胞定性鉴定 [打印本页]

作者: avi317 时间: 2012-7-11 12:42 标题: [求助]肝细胞定性鉴定

请教高手：肝细胞如何定性鉴定？

作者: 园丁## 时间: 2012-7-11 12:42

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请教高手：肝细胞如何定性鉴定？

可以从形态上来鉴别呀！

作者: avi317 时间: 2012-7-11 12:42

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可以从形态上来鉴别呀！

请教,需要染色吗?用什么方法染色好呢?

作者: fqswdzd 时间: 2012-7-11 12:43

肝细胞定性鉴定的方法很多
1、糖原染色：用PAS法
2、免疫组化检测白蛋白、ck－18、ck8、AFP等肝细胞特异合成或表达的表面标记（依发育时间不同，表达有所不同）
3、尿素测定：方法比较简单
4、LDL吸收的测定：好像也有试剂盒
另外你做的是什么肝细胞呀，是小鼠的吗？

作者: milkdog 时间: 2012-7-11 12:43

肝细胞性状的生物学检查包括形态和功能两个方面。
倒置显微镜下肝细胞为圆形，球形，细胞核位于细胞正中，可以见到双核的肝细胞，细胞直径约20uM，细胞边界轮廓清晰。
肝细胞培养数周后就会被一种含有透明胞质的小细胞代替，这种细胞形态与肝细胞略又不同，但具有典型肝细胞的多项功能特征，他们具有较高的γ－谷胺酰转肽酶，可以合成Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原，具有胰岛素和EGF的受体，其水平与分离的肝细胞相似，可以分泌多种血清蛋白，如白蛋白、转铁蛋白、甲胎蛋白。
在对肝细胞形态进行观察的同时还应该对肝细胞的特异性功能进行检测。肝脏的功能之一是将代谢中产生的有毒氨转化为无毒的尿素，因而检测培养肝细胞的尿素合成量成为检测肝细胞功能是否正常的有效手段。ALT的量是一种常用的监测指标，它反映了细胞在分离的过程中受损伤的程度。此外，白蛋白和甲胎蛋白的分泌量也是肝细胞功能状态的常用检测指标。

作者: avi317 时间: 2012-7-11 12:44

我做的是大鼠肝细胞,我也想用PAS,请问哪能买到试剂盒呀?

作者: TNT 时间: 2012-7-11 12:44

福建迈新公司有PAS试剂盒货号：MST－8037 8ml 180.00元
公司网址：
cuturl('http://www.maxim.com.cn/show/index.asp')

作者: yueban-1147 时间: 2012-7-11 12:44

鱼的肝细胞怎么鉴定呀，跟哺乳动物的蛋白一样吗

作者: ququer787 时间: 2012-7-11 12:45

我作的是小鼠的肝原代细胞，可是我看不到细胞核啊，但每次都提到了大量的这样的细胞，是肝细胞吗？它也不怎么贴壁，增殖很快。请高手帮我看看，我用什么方法可以鉴定是肝细胞？

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作者: baidukk 时间: 2012-7-11 12:46

楼上说的照片是多大倍数？形态好像有点不对？

作者: ququer787 时间: 2012-7-11 12:46

这是200倍下的，我也看不到细胞核，郁闷，我用的是灌流法
每次得出好多这样的细胞，要是不是肝细胞是什么细胞呢，多谢指导

作者: daod 时间: 2012-7-11 12:46

请问尿素试剂盒买哪里的好一点？

作者: lixi559 时间: 2012-7-11 12:47

请问哪位高手知道肝细胞是用灌流法获得好还是组织块法获得好呢？为什么我用组织块培养法三个小时后加液体都还没有肝细胞爬出来呢？

作者: lixi559 时间: 2012-7-11 12:47

楼上战友说的是肝细胞是悬浮生长的？我第一次用组织块培养（14h后加的液体）法获得的肝细胞为什么是贴壁生长的，到底肝细胞的生长特性是什么样的呢？

作者: lixi559 时间: 2012-7-11 12:47

楼上对于肝细胞的定性鉴定,可以采用形态学鉴定,对于ck-18抗原的鉴定不是很特异,因为这类抗原不是肝细胞所特异表达而是上皮细胞类所共同表达。本人采用葡萄糖-6-磷酸脱氢酶鉴定比较特异,也可以采用氢化可的松诱导，测定酪氨酸氨基转移酶活性也很特异。可以试一下，这2种方法都比较特异。

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