标题:
[求助]有关小鼠黑色素瘤细胞的问题
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作者:
yysr238
时间:
2012-7-25 16:31
标题:
[求助]有关小鼠黑色素瘤细胞的问题
最近要培养小鼠B16细胞,不知道应该注意那些问题?比如培养基的问题,用低糖的DMEM可以不?
还有我想把这种细胞接种到小鼠身上,不知道要接种多少才会种植成瘤?接种量的安全剂量是多少啊?谢谢各位战友
作者:
ha111
时间:
2012-7-25 16:32
我是用1640加10%CS养B16的,养过一个月时间,生长状态还可以。个人感觉细胞贴壁较紧,必须加0.25%胰酶用点力吹打传代。DMEM低糖没用过,但我有段时间1640缺,临时用高糖DMEM替代了一天,感觉不好,细胞有变圆的趋势,赶紧又换了回去。
接种小鼠用10的6到7次方可以了,0.2ml。
作者:
yysr238
时间:
2012-7-25 16:32
用0.25%胰酶消化的时候需要注意些什么呢?在这之前还需要用PBS清洗一下吗?大概要消化多长时间啊?是全贴壁的细胞还是半贴壁的细胞啊,需要用多大的转速离心啊?
有好多不明白的地方,希望各位战友不吝赐教!
作者:
redbutterfly
时间:
2012-7-25 16:33
一定要清洗的,培养基中含血清的,不能直接注射。
选对数生长期的细胞接种动物。
B16成瘤率比较高,成瘤后生长的较快,看试验的需要选择正确的接种数。10的6到7次方个人感觉太高了。瘤体生长太快,C57小鼠很快就死了。
作者:
yysr238
时间:
2012-7-25 16:33
皮下注射有没有什么更好的办法啊?有什么好的技巧啊?
作者:
yysr238
时间:
2012-7-25 16:37
用胰酶消化后直接把细胞分瓶可以不,不去除EDTA可以否?
作者:
yysr238
时间:
2012-7-25 17:22
10的6到7次方细胞/0.2ml吗?一个25cm的塑料培养瓶长满的话可以有多少细胞啊?谢谢
作者:
jujuba
时间:
2012-7-25 17:23
皮下注射就是试验操作,没有什么技巧,熟能生巧。
EDTA含量低的话不去除也可以。
10的6到7次方细胞/0.2ml挺多的,还是看你的试验要求与安排。一个25cm的塑料培养瓶长满最多也就2×10的6次方。
作者:
yysr238
时间:
2012-7-25 17:24
在活的老鼠身上可以测量肿瘤的大小吗?需要用什么工具吗?游标卡尺可以不?有计算的公式吗?谢谢!
作者:
zranqi_1
时间:
2012-7-25 17:24
可以用游标卡尺测量,计算公式是段径的平方×长径除以2
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