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标题: [求助]关于6孔板，12孔板，24孔板的选择！ [打印本页]

作者: 穿越时空 时间: 2012-7-31 13:22 标题: [求助]关于6孔板，12孔板，24孔板的选择！

我是新手，最近准备做流式检测凋亡。方法是加药后不同时间检测。园内查了一下，觉得还是很混淆。

我的药品很贵，经费有限。我的问题是：关于6孔板，12孔板，24孔板的选择工作容积分别是多少？一般接种细胞数多少（要求72小时后不要长满，因为要对照到72小时）？
它们的细胞数做流式够么？（sub-g1法）
请有经验战友赐教！谢谢！

作者: redbutterfly 时间: 2012-7-31 13:22

建议用6孔板。如果你的细胞是贴壁的，就尽量不要用24孔板，因为板越小越不容易长，而且孔板的边缘效应很严重，对细胞生长不好。但是就数量上，一般来说数量如果不是加药后死太多，数量是够的，只要你的细胞够100000就够上流式了。
培养容器  每个孔的表面积（cm2）  相对于24孔板的表面积  铺板培养基体积
96孔板  0.3  0.2  100μl
24孔板  2  1  500μl
12孔板  4  2  1ml
35mm板  10  5  2ml
6孔板  10  5  2ml
60 mm板  20  10  5ml
10cm板  60  30  15ml

这个数据是对贴壁细胞的，对于悬浮细胞，工作容积要大不少。

作者: HP007 时间: 2012-7-31 13:22

应该选用6孔板，一个是细胞数量的要求，上流式至少要有5×104细胞，而且你是做调亡试验的，如果是药物刺激调亡等，细胞会死的很多，这样如果24，12孔板细胞数量可能就会不够了。铺板密度要根据你的细胞类型决定，比如一般293T,6孔板要铺板4×105，如果是HELA,细胞比较大，就要铺大概1.6×105左右。如果你是要做质粒转染，铺板密度也和你要用的转染试剂有关，LIPO就要求细胞密度在转然的时候达到70％－90％以上，钙转就只要50％即可

作者: 穿越时空 时间: 2012-7-31 13:24

那么6孔板加1.5ml的容积可以么？细胞数大概过少范围？
12孔板加1.5ml的容积可以么？
请帮忙解答！谢谢！

作者: 穿越时空 时间: 2012-7-31 13:24

我是加药做凋亡的。分不同浓度在不同时间作。谢谢，请继续释疑！

作者: baidukk 时间: 2012-7-31 13:25

6孔板加1.5ml的容积略嫌少，至于细胞量自然是要你自己计数了。
12孔板加1.5ml的容积是可以的。
培养容器每个孔的表面积（cm2）相对于24孔板的表面积铺板培养基体积
96孔板 0.3 0.2 100μl
24孔板 2 1 500μl
12孔板 4 2 1ml
35mm板 10 5 2ml
6孔板 10 5 2ml
60 mm板 20 10 5ml
10cm板 60 30 15ml
我给你的这个表最后一个数值就是刚好铺板的体积。

作者: 穿越时空 时间: 2012-7-31 13:25

那我还是暂时决定用12孔板了！
最后问一下刚好铺板的体积是什么意思。6孔板 10 5 2ml 各个数据的意思是什么？
不好意思，我没看懂，烦溺水小鱼战友解释一下！我真的是第一次要考虑经济问题养细胞。（以前是给别人打工）。

作者: baidukk 时间: 2012-7-31 13:26

培养容器：6孔板
每个孔的表面积（cm2）：10cm2
相对于24孔板的表面积：5倍
铺板培养基体积：2ml

最后一个的意思是你要让培养基没过底部就至少要加2ml培养基。
我试过，1.5ml培养基是不能把6孔板的底部全部盖住的，就是说少于2ml就会使有的地方没有培养基。

good luck

作者: 穿越时空 时间: 2012-7-31 13:26

现在明白了！我觉得你相当于总结了一下关于培养板的问题！谢谢你的解释！

作者: baidukk 时间: 2012-7-31 13:27

没什么，我最近一直在和它打交道，所以比较有心得，也是大家互相进步啊呵呵。

作者: 穿越时空 时间: 2012-7-31 13:28

喔，我想问一下他们的价格你买的是多少？
谢谢你啊！

作者: baidukk 时间: 2012-7-31 13:28

6孔板我不记得了，只知道96孔板一箱（50块板）630元。

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