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标题: [求助]要分离小鼠血清，如何使其无菌？ [打印本页]

作者: ritou1985 时间: 2012-8-7 17:19 标题: [求助]要分离小鼠血清，如何使其无菌？

从小鼠眼球采血然后分离血清，因为要加到细胞培养中，请问如何使血清无菌？？

作者: Ao7 时间: 2012-8-7 17:19

非得眼球采血？这个好像有点困难的说，心脏或者是腹主动脉也可以啊

作者: dog002 时间: 2012-8-7 17:19

分离血清后再过滤行吗？虽然会损失很多。

作者: fqswdzd 时间: 2012-8-7 17:20

你可以求助卖小牛血清或者胎牛血清的厂家,他们卖的血清都是无菌的,不知道是怎样处理的.你可以联系北京鼎国公司,我们一直用他们的胎牛血清,就是他们自己生产的.

作者: fsdd817 时间: 2012-8-7 17:33

目前好像只能过滤吧.

作者: 3648755 时间: 2012-8-7 17:34

如果过滤的话一是会损失其中的营养成分,二是其中混有的血细胞会很容易阻塞滤器,一个微孔滤器12.00元,一次大概只能滤10毫升,并且是一次性的,你觉得划算吗?

作者: xueyouzhang 时间: 2012-8-7 17:35

谢谢各位！
从眼球采血所得的血清也就几百 ul ，过滤不好操作吧？

作者: 小螺号 时间: 2012-8-7 17:38

小鼠麻醉后，备皮、消毒、打开胸腔，无菌状态下用注射器心脏取血，或无菌状态下尾静脉取血。

作者: 小螺号 时间: 2012-8-7 17:38

今天我特意问了一下有做过从小鼠眼球采血并制血清的师兄，他说要灭菌只有通过过滤。不过他说一般能采2ml呢，比你说的好像要多些哈。如果非要自己做那就想办法多采一点，比较划算嘛。

作者: ritou1985 时间: 2012-8-7 17:40

今天我特意问了一下有做过从小鼠眼球采血并制血清的师兄，他说要灭菌只有通过过滤。不过他说一般能采2ml呢，比你说的好像要多些哈。如果非要自己做那就想办法多采一点，比较划算嘛。

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谢谢!
是用针式滤器吗?孔径0.22 ?

作者: fklo83 时间: 2012-8-7 17:42

在给楼主出个主意，不知可行与否，将血清与培养基混合后（血清浓度比实验要求高2~3倍)，再用针式滤器过滤（一般细胞相关试验滤器都用0.22的，0.45的用于细菌的相关操作。）不但可以降低液体的黏度，使滤过更省劲，而且增加液体的体积，减小血清的损失。

作者: fklo83 时间: 2012-8-7 17:43

谢谢!
是用针式滤器吗?孔径0.22 ?

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有一种无残液微量滤器，可以问问供应商。

作者: dog002 时间: 2012-8-7 17:43

能否多采几只老鼠的血清然后一起过滤，过滤后可以分装保存。是0.22um的。

作者: ritou1985 时间: 2012-8-7 17:44

谢谢大家的出谋献策！！

我想要保留血清中有关的 IgG 抗体，过滤该不会把抗体给滤掉吧？？

作者: glass 时间: 2012-8-7 17:44

谢谢!
是用针式滤器吗?孔径0.22 ?
对，是用0.22的针式滤器。

作者: rxcc33 时间: 2012-8-7 17:45

能否多采几只老鼠的血清然后一起过滤，过滤后可以分装保存。是0.22um的。

似乎不行吧，不同小鼠的血会不会发生溶血现象呢。

作者: dotaaa 时间: 2012-8-7 17:46

再用滤器最好要买ＰＥＳ的膜，不易堵．

作者: eric930 时间: 2012-8-7 17:46

谢谢各位!

我突然想起我用的小鼠是SPF级别的,也是在SPF房里饲养的,

即使是从眼球分离的血清该也是无菌的吧 ?

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