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标题: [讨论帖]养悬浮细胞的进来聊聊 [打印本页]

作者: 麦丽素1986 时间: 2012-9-3 14:07 标题: [讨论帖]养悬浮细胞的进来聊聊

我发现养悬浮细胞的人不多啊，有养过得互相交流一下啦，比如细胞培养，细胞形态等等

作者: shenkunjie 时间: 2012-9-3 14:08

悬浮细胞很好培养啊，而且生长密度比贴壁生长大。最省事的传代培养是不需要做消化处理，减少污染环节。

作者: 麦丽素1986 时间: 2012-9-3 14:08

我知道好养，可细胞在显微镜下是什么样的？感觉圆圆的，有空泡，像要死了的贴壁细胞。悬浮细胞在活力好的时候是什么状态啊？谢谢赐教！！如果活力不好又是什么样的？可否发个照片让我瞧瞧，嘻嘻

作者: kulee 时间: 2012-9-3 14:08

悬浮细胞在操作时，比贴壁细胞简单，不需要消化等步骤。
一般呈圆形，透光性好，发一张活性好的照片：

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作者: kulee 时间: 2012-9-3 14:09

再发一张活性差的照片，有些杂质，背景不干净：

图片附件: 27887911.jpg (2012-9-3 14:09, 35.82 KB) / 该附件被下载次数 7
http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=13676

作者: okhaha 时间: 2012-9-3 14:09

悬浮细胞传代是不用消化，可有时需离心，离心过程一样可能会发生污染。处于对数期的悬浮细胞不是很圆，光亮，边缘比较锐利；而状态不好的细胞比较暗，很圆，细胞内颗粒比较多，有的有空泡。偶养的是CHO，别的悬浮细胞是不是这样偶就不清楚了。

作者: okhaha 时间: 2012-9-3 14:10

大家的悬浮细胞是用什么器皿来养的？养到多大规模呀，能达到多大密度？

作者: yychen 时间: 2012-9-3 14:10

CHO细胞是贴壁的呀，照你的意思好象是悬浮的呀，不对吧，我养的是贴壁的呀。我想知道你的照片是不是CHO的，要是的话，我觉得不可能

作者: okhaha 时间: 2012-9-3 14:10

CHO进行悬浮适应性培养后，就可以变成悬浮的了，用于表达目的蛋白，悬浮的比贴壁的优点多的多。

作者: kulee 时间: 2012-9-3 14:11

悬浮细胞在离心时，关键是要注意离心速度，我一般选择800转/分,5min。一般认为离心速度越大，对细胞的损伤越大。
此外就是要注意无菌操作了，关键是打开和关闭离心管之前要烧一下管口。
培养瓶没有特殊要求，不象贴壁细胞需要防脱处理。我们使用的100ml玻璃培养瓶，是家门祖传的家宝，呵呵（物美价廉）。

作者: qumm1985 时间: 2012-9-3 14:11

请教一下，悬浮细胞如何进行免疫组化检测？需要甩片吗？

作者: wsll 时间: 2012-9-3 14:11

我养的也是悬浮细胞。但离心速度达到2000转/分（rcf:3000g)，10min，细胞仍然在离心管上贴壁不牢，吸去培养液时，细胞容易漂起来。细胞培养时间长了，背景特别不干净，就像上图所示的一样，而且碎片不容易除去。能帮我分析分析吗？
悬浮细胞可以用玻璃培养瓶或一次性塑料的都行！

作者: 麦丽素1986 时间: 2012-9-3 14:12

谢谢大家，给了我不少帮助。我得细胞是H22，小鼠肝癌，能产腹水。细胞在体外养的像第二张图片，看来活性不好啊，加把劲！！欢迎大家多进来交流

作者: 18332751696 时间: 2020-8-27 09:40 标题: 悬浮细胞淋巴瘤细胞的培养

悬浮细胞怎么区分死的和活的，周围有光晕的是活的，暗的是死的吗

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