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标题: 转帖关于LCQ氯霉素定量的问题 [打印本页]

作者: 玩具 时间: 2008-2-11 01:53 标题: 转帖关于LCQ氯霉素定量的问题

产品名称：LCQ Fleet离子阱液质联用仪文章类型：产品提问

本人在利用离子阱质谱测定氯霉素，实验过程如下：

1.氯霉素标准溶液进样，浓度0.5ng/mL，重复进样6次，计算RSD＝2.3％
2.氯霉素内标（D-5）标准溶液，浓度5ng/mL，重复进样6次，计算RSD＝2.5％
3.氯霉素和氯霉素内标混合溶液进样，氯霉素标准浓度0.5ng/mL，内标浓度5ng/mL，重复进样6次，计算RSD＝15.3％

希望解决问题
为何单独进样，RSD很小；而混合溶液进样RSD飙升？

提示：
1.氯霉素标准RT和氯霉素内标RT相差0.01min
2.排除仪器不稳定因素（进样采取随机进样法，即18次进样打乱顺序，随机进样）
3. 溶液都是当天配置，不存在过期问题

高手赐教！

作者: mass 时间: 2008-2-11 01:53

我觉得你这个问题可能出现的情况有很多吧。

1）是否存在离子抑制情况

2）是否是流动相溶解的标，一般用流动相配制的标稳定些

3）自动进样器是否设置好？

作者: 玩具 时间: 2008-2-11 01:54

非常感谢的你的建议！

但是我认为问题主要在你的建议1.，理由如下：

1）所有标准溶液均使用流动相初始梯度浓度配制，没有问题

2）自动进样器没有问题。如果有问题，内标法会比外标法更加准确；进样是打乱顺序进样，例如先进单氯霉素标准，然后进氯霉素内标标准，再进混合溶液，再进氯霉素内标溶液，依此类推，而不是一个溶液连续进样6次，再换另外一个溶液进样6次。如果自动进样器有问题，就会出现异常数值。

所以经过我的考虑，鄙人认为只有建议1是造成RSD出现如此之大的原因。

到底是什么在抑制？

是不是内标和标准互相干扰？产生混合溶液RSD大。

作者: dingdang 时间: 2008-2-11 01:56

有没有单独看看同一浓度混标和单标下出峰的响应有没有变化？

如果变化很大的话mass的建议就非常对了。

作者: 玩具 时间: 2008-2-11 01:56

老兄，你的建议也很正确。

所有内标和标准溶液的浓度全部是一样的！

在这种情况下，出现这样的结果，我认为是离子阱质谱和四极杆工作原理不一样造成的。

作者: dingdang 时间: 2008-2-11 01:57

能否明确一下您的要点3？

“氯霉素和氯霉素内标混合溶液进样，氯霉素标准浓度0.5ng/mL，内标浓度5ng/mL，重复进样6次，计算RSD＝15.3％”

内标浓度是氯霉素标准浓度的10倍，还有RSD＝15.3％是指峰面积还是计算出的浓度？保留时间差0.01min，浓度相差较大，在阱内会有抑制。

作者: 玩具 时间: 2008-2-11 01:57

你的提醒十分及时！

现在我再详细叙述一下：

1.氯霉素标准溶液0.5ng/mL，重复进样6次。计算浓度值RSD＝2.3％
2.氯霉素内标溶液5ng/mL，重复进样6次。计算浓度值RSD＝2.1％
3.氯霉素标准溶液（0.5ng/mL）氯霉素内标溶液（5ng/mL）混合溶液，重复进样6次。计算浓度值RSD＝15.3％（比值）

补充说明：理论上内标在质谱上的响应应该和标准一样。可惜，不知什么原因，内标响应没有标准高。准确说虽然混合溶液浓度相差10倍，但是峰面积只相差3倍。基本上在可以允许的范围之内（一般内标峰面积规定在标准峰面积正负10倍以内，这是可以接受的范围）。

作者: dingdang 时间: 2008-2-11 01:58

可以比较一下内标和标样分别单独进样时的响应因子，以及混合进样时的响应因子，如果有很大差异，您可能必须将他们分离得更好一点，不过太难了。

作者: matrix 时间: 2008-2-11 01:58

是不是内标浓度太大了？

改用0.5ng还有问题吗？

作者: zhangsan 时间: 2008-2-11 01:59

有没有可能是cross-talk的问题？

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