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标题: 转帖 Waters utlima 使用心得 [打印本页]

作者: 红杏 时间: 2008-2-11 14:27 标题: 转帖 Waters utlima 使用心得

产品名称：Quattro Premier XE三重四极杆液质联用仪文章类型：导用/使用体会/维护技巧

Waters ultima是不是很垃圾啊？....我做试验，怎么连接老是出问题。

1）噪音好高，用的2695液相。

2）自动进样器连接总会出问题。经常显示错误无法进样。

3）自动进样器的100ul的定量环，让我在使用0.2流速的细内径柱，柱压在进样的开始会有两次波动。突然升高1400psi，然后柱压掉到0，再慢慢升高。如何解决？

4）quanmynx 4.0的软件是不是会常出现连接中断的问题?

5）质谱扫描，波动很大，调节参数基本看不出来响应是增强还是降低。

6）用蠕动进样，常会漏液，看不到自己的样品峰，必须得用手动往里推动才会明显看到自己的东西...

7）用纯甲醇在冲洗系统进质谱时，很快锥孔就明显看到似乎脏了。

8）质谱的能用缓冲盐浓度最高应不超过多少?我加了5mmol/l醋酸胺后，灵敏度降低很快。这个仪器如果常时间用5mmol/l醋酸胺..影响有多大?是不是要经常清洗?

求用过这个仪器的同行能帮助

作者: 红杏 时间: 2008-2-11 14:30

这个串联质谱的噪音非常的高！

我试了几个不同类型的化合物，基本噪音都有4*e3左右，你们呢？

对于串联质谱，这个噪音似乎太高了吧。灵敏度改为13或15区别很小，噪音强度相似。

可有怎样降低这个仪器噪音的建议？

作者: zhangsan 时间: 2008-2-11 14:30

QUOTE:

自动进样器的100ul的定量环,让我在使用0.2流速的细内径柱.柱压在进样的开始会有两次波动.突然升高1400psi,然后柱压掉到0,在慢慢升高.如何解决.

压力波动可能是六通阀太脏了，拆开清洗就可以了。

100uL的定量环是不是太大了一点，0.2mL/min时，可有0.5min的系统延迟哦！

作者: zhangsan 时间: 2008-2-11 14:31

QUOTE:

用纯甲醇在冲洗系统进质谱时,很快锥孔就明显看到似乎脏了

是不是甲醇质量有问题！

作者: zhangsan 时间: 2008-2-11 14:32

[quote]质谱的能用缓冲盐浓度最高应不超过多少?我加了5mmol/l醋酸胺后,灵敏度降低很快.这个仪器如果常时间用5mmol/l醋酸胺..影响有多大?是不是要经常清洗? [quote]

NH4Ac本来就有信号抑制，5mM浓度已经相当高了。

作者: 红杏 时间: 2008-2-11 14:32

配备的定量环就是100ul的，无法更换。

蠕动泵是Waters单独配备的，是单个的，而且在软件上不可以控制的，就是单个系统，很奇怪。

甲醇是B&J..公司的，没有用过，不知道质量，有用过的给个消息如何？因为订购试剂公司只做这个代理，所以他极度不愿意换试剂。我想知道有没有其他人用这个试剂做效果如何。

5mM用量就够高了啊？我们经常用这个浓度的。

作者: zhangsan 时间: 2008-2-11 14:32

我用过许多公司的仪器，包括手动和自动进样，没有听说定量环不能换的。

作者: dingdang 时间: 2008-2-11 14:33

漏夜可能是你的毛细管堵了或你的毛细管套管松了，仔细检查一下，定量环没必要换。

作者: dingdang 时间: 2008-2-11 14:42

甲醇最好用fisher的，水用超纯水，试剂用优级纯，最好是sigma 的！

作者: dingdang 时间: 2008-2-11 14:43

关于噪音问题：

一是流动相不纯

二是调谐参数问题，在调谐时不要只看信号值，也要看噪音值，调到最大的信噪比是你的理想状态，其他的可以不去关心。

三是抓住主要问题，不要被一些小事困扰

作者: 红杏 时间: 2008-2-11 14:44

2695的定量环似乎就是个塑料管。

工程师拆开的时候没看仔细。问工程师说不能换。

作者: dingdang 时间: 2008-2-11 14:44

我想问一下，你的保留时间重复性好吗？

如果没问题，不必在意其他问题，分析工作中要抓住主要的问题，如果所有问题都在意，你会在自己画的圈里出不来，认为所有的东西都不正常，往往把简单的问题复杂化，虽然你的精神是好的

作者: 红杏 时间: 2008-2-11 14:46

液相没问题。保留时间基本无多大改变。

用小柱子，柱压升高1500psi左右，达到4500psi，柱压过高可能会引起填料的改变吧？虽然时间比较短。

现在将就做，暂时还没出问题。

作者: dingdang 时间: 2008-2-11 14:47

柱压升高不会影响到你的柱子。

压力的升高是由于流路变化引起的，压力升高是压力阻尼管引起的，此压力不会到你的柱子，只是柱前压力升高。

就像如果管道堵，虽然压力很高，但液体却到不了你的柱子，不能说此压力会损伤你的柱子。此压力只是系统压力的变化，不是你柱子压力的变化，如果你柱子进口有压力传感器的话，你就观察不到压力有太大的变化，看一下进样原理图你就会明白。

作者: dingdang 时间: 2008-2-11 14:48

做液质和液相有点区别：

你加醋酸铵的目的是抑制你的样品解离，是使你的样品在色谱中有保留，得到很好的分离。但质谱中碱性样品一般要做正离子分析，你的醋酸铵又抑制了你的电离，降低了你的信号值，并产生较强的(M+H)+信号，影响你的基线，
质谱NH3AC 最大加入量是10mmol/l，这是一个矛盾添加物，根据你的需要调整。

另外，由于你用的是细柱，柱外效应你要考虑，非常重要，包括进样体积，溶解样品的溶剂，否则你的信号很差。

作者: 红杏 时间: 2008-2-11 14:49

QUOTE:

灵敏度改为13或15区别很小，噪音强度相似，可有如果降低这个仪器噪音的建议？

这个问题。我自己想了下。是和仪器本身有关，我以前做的Finnigan的TSQ Quantum，第二个四极杆是弯的设计，而这个WATERS UTLIMA的碰撞室是直的。所以噪音比那高应该是正常的。

作者: 红杏 时间: 2008-2-11 14:56

QUOTE:

100uL的定量环是不是太大了一点，0.2mL/min时，可有0.5min的系统延迟哦！

这观点似乎有点不对。

从六通阀的切换原理上说，不管多大的定量阀，在进样时，不会有系统延迟的。

因为进样定量环（1~4位置），进样是在接近1号位置，切换后，也应该是接近1号口样品先进入柱子，不会有系统延迟的。也就是说，样品进入定量环的方向和切换后流动相进入的方向是反向的呀。

想深入探讨下~~交流...

作者: mass 时间: 2008-2-11 14:57

QUOTE:

quanmynx 4.0的软件是不是会常出现连接中断的问题？

不会经常出现你说的问题的，但是软件和仪器连接的反应是比较慢，大概感觉上要超过30秒。

你如果发现软件与液相的连接出现问题，用软件无法控制液相了，你可以reset一下液相与软件的连接，要耐心一点，不要狂点，实在不行，让工程师让你重新安装一下软件，或者操作系统也重装一下。

作者: matrix 时间: 2008-2-11 15:00

QUOTE:

自动进样器的100ul的定量环，让我在使用0.2流速的细内径柱，柱压在进样的开始会有两次波动，突然升高1400psi，然后柱压掉到0，在慢慢升高，如何解决？

我发现我进样的时候也会有压力突然降低的情况。领导说是阀切换的原因，如果你进样的重现性是好的，就不要太放在心上。

以前我用其它仪器，由于仪器旧了，六通阀出现问题进样的时候会压力升的非常高，甚至是爆压！

所以你关心注意这个是非常对的，但是仪器使用正常，你就先放心。

作者: matrix 时间: 2008-2-11 15:02

QUOTE:

5）质谱扫描，波动很大，调节参数基本看不出来响应是增强还是降低。

6）用蠕动进样，常会漏液，看不到自己的样品峰，必须得用手动往里推动才会明显看到自己的东西...

这最有可能是蠕动泵的前面塑料连接口没有拧紧。

我也经常漏，很郁闷的，你拆下来好好调节一下它的松紧，或者是你的石英毛细管管堵了，一定要注意用后清洗！它又细有长很容易堵的，有一点压力，你蠕动泵就溜了。

也可能就堵在石英毛细管的头上，你可以考虑截掉一部分。

作者: matrix 时间: 2008-2-11 15:04

QUOTE:

7）用纯甲醇在冲洗系统进质谱时，很快锥孔就明显看到似乎脏了。

那影响你的灵敏度不？看到锥孔脏了就拿下来清洗，我一般一个星期到二个星期就要清洗一次。

作者: matrix 时间: 2008-2-11 15:06

QUOTE:

8）质谱的能用缓冲盐浓度最高应不超过多少?我加了5mmol/l醋酸胺后，灵敏度降低很快。这个仪器如果常时间用5mmol/l醋酸胺..影响有多大?是不是要经常清洗?

一般能用到10 mmol/l醋酸胺。

你为什么用醋酸胺？？？一般用醋酸胺不是为了增加离子化效率，减少加Na+峰什么的

增加灵敏度，就是为了调整出峰位置，什么叫灵敏度降低很快呢！

用盐当然要清洗！！柱子、管路、毛细管都要用不含盐的适当溶剂冲洗。

解答的不对的地方请大家见谅！

作者: mass 时间: 2008-2-11 15:13

QUOTE:

这个串联质谱的噪音非常的高！

我试了几个不同类型的化合物，基本噪音都有4*e3左右，你们呢？

对于串联质谱，这个噪音似乎太高了吧。灵敏度改为13或15区别很小，噪音强度相似。

可有怎样降低这个仪器噪音的建议？

你的仪器是不是不是你第一个使用的？你中间接手的，你的质谱的噪音都有4*e3左右，那你有什么好做的？

不是流动相有问题，就是液相管路要清洗，质谱也要清洗，一般本底<100pcs还差不多。

不过以前我不用四元泵，自己配制混合流动相时，也发生过这样的事情。流动相上去，本底就有上千，这是在配制流动相的时候，污染了流动相。

作者: 红杏 时间: 2008-2-11 15:15

QUOTE:

一般能用到10 mmol/l醋酸胺。

你为什么用醋酸胺？？？一般用醋酸胺不是为了增加离子化效率，减少加Na+峰什么的

增加灵敏度，就是为了调整出峰位置，什么叫灵敏度降低很快呢！

我加盐是色谱条件的需要。仪器是后来接手的。原来很久没用。流动相不会被污染。

作者: mass 时间: 2008-2-11 15:17

QUOTE:

原帖由红杏于 2008-2-11 14:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

这观点似乎有点不对。

从六通阀的切换原理上说，不管多大的定量阀，在进样时，不会有系统延迟的。

因为进样定量环（1~4位置），进样是在接近1号位置，切换后，也应该是接近1号口样品先进入柱子，不会有系统延迟的。也就是说，样品进入 ...

在走等度的时候是没有问题的。

但是走梯度的时候，100ul的定量环好比一个混合器，有剃度延迟和溶剂扩散导致剃度不准确等问题。

这个观点同意吗？

作者: 红杏 时间: 2008-2-11 15:17

明白了~

作者: snow_white 时间: 2008-2-11 15:19

我想问两个问题：

1）你用的液相2695有六通阀吗？好好看看说明书再来讨论

2）定量环是干吗的？
定量环的大小只会影响你的梯度延迟时间，不会影响你的梯度准确度。对低压梯度来说，梯度的准确度只和比例阀的精度、压缩比的调节能力有关，和其它的无关，更谈不上扩散。

作者: shark 时间: 2008-2-11 15:20

2695是靠v1,v2,v3,v4四个阀转换来进样的，在面板上可以看到的，没有六通阀。

所以你们前面讨论的主体错了，所以无法得出正确的结论。

作者: shark 时间: 2008-2-11 15:22

100uL？这么大的进样量，就是做液相的都很少用，峰会变形的。

作者: shark 时间: 2008-2-11 15:22

这台仪器的灵敏度非常高。估计你那里的基线高是由于流动相污染。仪器的基线高一般不要考虑仪器自身的问题，多数情况是出在电离过程中有杂质或电离电压过高等问题。

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