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标题: [求助]为什么培养基变黄 [打印本页]

作者: hot_hot_hot 时间: 2012-9-9 09:43 标题: [求助]为什么培养基变黄

本人培养黑色瘤细胞B16F10，以前细胞长满培养瓶底部时，第二天培养基也没问题。但是现在，在很低的细胞浓度下更换培养基，第二天培养基就变的很黄，而且连续三天（每天都更换培养基）。不过培养基没有变浑浊。

作者: S6044 时间: 2012-9-9 09:44

我也遇到过这种情况，但是我敢肯定不是污染，当时是在细胞刚刚转染完，我觉得是不是与当时的状态与细胞的特点有关。我是消化了一次换了个培养板就好了

作者: yychen 时间: 2012-9-9 09:44

应该是有污染，不一定是细菌，可能是支原体或“胶虫”之类。

作者: pencil菲 时间: 2012-9-9 09:44

培养基变黄是酸碱度的问题。培养基偏酸就会变黄。

作者: hot_hot_hot 时间: 2012-9-9 09:45

我现在也遇到这样的问题.
96孔板中细胞长的很多,我想是因为细胞代谢太快,没有想到是污染,就4个孔.
我想问,怎样确实是污染了?

作者: hot_hot_hot 时间: 2012-9-9 09:46

酸碱度测过了，没有问题，用精密pH试纸测定为7.0。放大800倍后发现有少量的细菌。但是经过这么长时间了还是没有发现培养基有变混浊的现象。

作者: bananapeople 时间: 2012-9-9 09:46

本人培养黑色瘤细胞B16F10，以前细胞长满培养瓶底部时，第二天培养基也没问题。但是现在，在很低的细胞浓度下更换培养基，第二天培养基就变的很黄，而且连续三天（每天都更换培养基）。不过培养基没有变浑浊。

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你配的培养基是不是新鲜的，如果是旧的，那是很容易变黄的
还有你用的培养箱是不是进口的，我们这儿用的是国产的，一年后，co2只能放1.5%，多了培养液就变黄，尤其是1640，而DMEM，没有这个问题
还有你用的培养基养其他细胞是不是也是这样？或者其他培养基是不是也是这样？

一般来讲没有发现培养基有变混浊，就说明不是染菌，而且一般染菌后，细胞很难贴壁和生长

作者: hot_hot_hot 时间: 2012-9-9 09:46

我们的培养相应该是国产的。不过co2显示很正常。其他细胞没有这个问题，只有这种细胞，而且以前没有这种情况。但是高倍显微镜下确实有菌。只是长不起来而已

作者: bananapeople 时间: 2012-9-9 09:47

其他细胞是不是用的是同样的培养基(什么培养基)

作者: zsxan1990 时间: 2012-9-9 09:48

战友，你所说的培养基变黄的现象首先肯定是ph变化了，至于这一点有许多原因可以解释：
1.高度怀疑污染（重点怀疑为细菌污染），最好做个细菌培养验证一下。再次强调，一定要纠正染菌后一定出现浑浊的思维定势，从来没有人说过这样的话，全部都是某些战友自己想当然的。
2.液体是否缓冲恰当，培养箱的二氧化碳含量是否适中。
解决方法：高度建议将培养基放入培养箱一段时间，观察其是否变黄，如果是则可能是污染或者ph不好。接下来做个细菌培养试验，双管齐下。

作者: xueyouzhang 时间: 2012-9-9 09:48

麻烦战友们：培养瓶中细胞周围有黑胶虫，请问该如何处置？这瓶细胞还能继续培养和用于实验吗？谢！

作者: huifeng0516 时间: 2012-9-9 09:49

还有一种可能，就是支原体污染，支原体污染一般只是表现为培养基变黄，对细胞生长没有明显影响，而不易检测，据说有很大一部分实验室的细胞都存在支原体污染，只是没什么明显影响，大家通常忽略罢了，具体检测的话，我只知道军科院可以检测。

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