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标题: 【求助】传说中的“黑焦虫”浮出水面 [打印本页]

作者: junhun 时间: 2012-9-14 14:04 标题: 【求助】传说中的“黑焦虫”浮出水面

忙于培养细胞，可是撞上了黑焦虫！郁闷，看来要晚回家了，唯一的心理安慰就是把照片发到心爱的DXY上，让大家评论，如果斑竹能施舍几分，便是对我最大的安慰了！

我培养的是NIH的骨肉瘤细胞，这种细胞中由于转导多种质粒，所以加了多种抗生素（hyg G418 pur），但是培养后第三天还是出现如下图的细菌，这就是传说中的黑焦虫吗？请亲眼见过黑焦虫的同志鉴定。

细胞间的黑点，光镜下观察快速运动

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http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=13845

作者: u234 时间: 2012-9-14 14:05

这种情况我也遇到过几次，用多种抗生素液没有用，最后只能扔了。

作者: baidukk 时间: 2012-9-14 14:05

不是吧，浮起来的怎么看都象细胞碎片呀。如果你说的是瓶壁上的黑点我想就更不是了，用玻璃瓶养细胞时间长了都会有这种黑点。不知道你说的什么是黑胶虫。

作者: gemei0115 时间: 2012-9-14 14:06

我个人感觉是细胞状态不好的缘故（类似的情况我也出现过）
这种情况大多是因为换血清造成的。因为不同批次的同一厂家的血清都会不同，如果你的细胞耐受差的话就会出现这种黑点。如果细胞最终适应了就会好转，但是楼主的细胞看来只有扔掉了。

作者: TNT 时间: 2012-9-14 14:07

所谓“黑焦虫”是否就是支原体?
如是,可加Mycoplasma removal agent (MRA,ICN Biomedical, Inc, 5ml200)去除

会动的密密麻麻的"小不点"以前常见,加过MRA两个里败之后,就可彻底干净

作者: yysr238 时间: 2012-9-14 14:07

我的细胞里也有
和楼主的很像！

作者: xueyouzhang 时间: 2012-9-14 14:08

呵呵，我的细胞也这样了。没办法啦。

作者: bohe221 时间: 2012-9-14 14:08

你的细胞里好象有很多脂滴或色素之类的东西，不知是原本就有呢，还是后来状态不好了才出现的？这些东西好象是细胞衰老的表现。

作者: lagua123 时间: 2012-9-14 14:08

感觉很象真菌，你多洗几次，勤换液试试

作者: kswl870 时间: 2012-9-14 14:09

应该是细菌污染，因为黑焦虫最后越养越多，呈现交织状生长，用PBS洗也没有多少用，细胞间隙间总是黑的斑点，但是绝对不会四处游动。如你描述，快速游动，极有可能是细菌哦～～～～

尽管你加了多种抗生素，但是某些细菌还是有机会生长的。

请问，培养液浑么？

作者: wu11998866 时间: 2012-9-14 14:09

不知道你所见的“黑焦虫”在高倍镜下的快速运动是否表现为伸缩，左右扭动；我曾经遇到过此类问题，用大剂量的抗生素（青、链霉素）冲击8-12小时后，反复换几次液体即可。

作者: yes4 时间: 2012-9-14 14:09

应为“黑胶虫”

作者: idea2011 时间: 2012-9-14 14:10

和我们实验中遇到的情况相似，大量小黑点，在高倍镜下的快速运动，（个人怀疑是一种复合性污染，可能带支原体...）试过环丙沙星，可杀灭，效果还是较为理想的。大家不防试试！

作者: lixi559 时间: 2012-9-14 14:10

是支原体！

如果有细胞备份，建议重新解冻。并且要彻底将hood,incubator灭菌！

作者: hold住 时间: 2012-9-14 14:11

养过细胞的看着都会眼熟的.管它叫啥呢?反正是污染.我们加了普通双抗效果就不错了!不过你的细胞病入膏肓了,扔了吧!该消毒的消毒该过滤的过滤.养细胞是细活,急不得!

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