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标题: 【求助】一张滤膜过滤除菌 [打印本页]

作者: 知了知了 时间: 2012-11-3 12:46 标题: 【求助】一张滤膜过滤除菌

由于特殊情况,一张滤膜过滤除菌,配dmem,能管吗

作者: 冰岛老叟 时间: 2012-11-3 12:47

我用过一张,0.22um的,可以的

作者: BUK 时间: 2012-11-3 12:48

我们一直用一张0.22um的滤膜除菌，效果不错。

作者: 知了知了 时间: 2012-11-3 12:48

用0.45的只怕不能吧，有谁只用0.45的

作者: minran_1980 时间: 2012-11-3 12:48

如果要用机器加压的话就不能保证了，我们一般用三到五张膜，加压过滤，比较快。

作者: yes4 时间: 2012-11-3 12:49

原则上一张0.22的就可以了，不过我通常都用2张0.22，或者1张0.45加1张0.22的，

作者: 羊咩咩 时间: 2012-11-3 12:49

用一张，够悬，如果加压使点劲，很容易破的，到时候前功尽弃，还是两张保险一点!

作者: memory 时间: 2012-11-3 12:49

我们都用2张0.22,其实一张0.22和一张0.45也可以.

作者: 张先生 时间: 2012-11-3 12:50

战友：你好！
特殊情况可以采用滤膜除菌，而且很方便呢！下面介绍一种方法是用小滤膜滤器过滤液体除菌。
具体过程如下：
1.小滤膜放入去离子双蒸水中，煮至沸腾；
2.取出滤膜，装入小滤器中，扭紧后再松开一圈；
3.高压蒸气灭菌，其后自然干燥；
4.使用前先拧紧小滤器， 10ml 注射器接上小滤器上口，加入 2 ml 待滤液体，推上针芯，并保留数毫升气体；
5.推压针芯，液体滤尽后，继续适当用力推压，针芯有弹性并不能将气体推尽，则表明此滤器滤膜是安装完好的；
6.正式过滤待滤液体。滤完后再次推空气，如有阻力，表明过滤过程中滤膜保持完好；
7.打开小滤器，再次检查滤膜是否完好。如果发现滤膜破损，应重新过滤。
这种方法的特点是：
1．小滤膜器使用方便，适于少量液体过滤；
2．有些有机物质（如 DMSO ）可溶解滤膜，因而不能使用；
3．市场上有成品出售，可直接应用，但仍应在过滤前后用推注气体的方法检测滤膜是否完好；
4．一些大分子蛋白质可以粘在滤膜上，损失很大，可以先用少量血清或蛋白质冲洗一下滤膜，可减少这种损失。

作者: tie8 时间: 2012-11-3 12:51

我们实验室每次都用2张0.22UM,别舍不得用两张

作者: ritou1985 时间: 2012-11-3 12:51

我们也一直用两张0.22的，放虑膜后，过滤器的旋钮不能拧的太紧，容易把虑膜拧破了！

作者: ROSE李 时间: 2012-11-3 12:52

我们一般把0.45um的放在上方，下面放0.22um的。0.22um的放的张数太多，过滤时很慢。每次结束要检查虑膜情况。

作者: zsxan1990 时间: 2012-11-3 12:52

进口过滤膜的一般用一张就可以, 国产的一般用二张.

作者: gemei0115 时间: 2012-11-3 12:53

我们一般也是用两张0.22的，有次我只用了一张0.22的过滤培养液，也没污染。过滤培养液关键是看你配培养液的玻璃器皿是否清洁（最好是酸清洁过的）这样污染的几率就小多了。

作者: lxh031 时间: 2012-11-3 12:54

我们都用2张0.22滤膜，过滤时连耳球加压至最大时也滤的比较慢，但现在不知道什么原因，稍微加压就成线流下，好怕怕，搞的我都不敢用，郁闷！我现在用小滤器加2张0.22小滤膜过滤，用的还好就是效率好慢。

作者: huifeng0516 时间: 2012-11-3 12:55

我们不久前也过滤了DMEM7升,先前我都不知道滤膜也有正反,这次是领教了.我们有一张滤膜放反了,天哪!20分钟一瓶.

作者: wood533 时间: 2012-11-3 12:55

呵呵,有卖的,外国进口的,不是很贵,但是安全的很,几少出现膜破的情况.而且各种直径的都有,我说的整个膜的直径,孔直径用0.22微米的就行,而且不需要任何处理,直接就可以用,各生化公司都有卖,和乐而不为呢

作者: star#room 时间: 2012-11-3 12:56

是呀, 做出来的数据老外也承认, 又不会带来第二次污染, (国产的膜本身会有杂质等) 价格差别也不大, 和乐而不为呢!

要进口的过滤膜的话, 就找我吧! 价格优惠, 量大的话, 还可以有其他促销.

作者: yjf1026 时间: 2012-11-3 12:56

滤膜有正反面，是不是光面的向上，在线等，谢谢

作者: gogo 时间: 2012-11-3 12:57

在除菌过滤中一般是知名品牌如PALL、MILLIPORE等一张0.2um的就可以了，国产膜便宜，多用几张也可以，这样更安全！除支原体的话一定要用0.1um的，国产膜好像是没有这样小孔径的！

作者: 兔唇 时间: 2012-11-3 12:57

楼上说的对,光滑面象上,过滤时正面象上,最好过滤时把滤膜在去离子水中浸泡过夜

作者: woshituzhu 时间: 2012-11-3 12:58

也可以用G5或G6的玻璃滤器，不过使用前将滤器，抽滤瓶等包好，在121度下，高蒸汽灭菌20分钟，即可。过滤后仪器可以用化学纯浓硫酸5.72ml、化学纯硝酸钠2.0克和蒸馏水94ml充分混合，用其抽滤，或浸泡24小时，再用蒸馏水充分抽滤，冲洗，包装好，高压灭菌后备用。

作者: zhenxin 时间: 2012-11-3 12:58

通常我是用两张，0.45在上，0.22在下，但我没有楼上说的那样要泡过夜，润湿了，大约10分钟就装到滤上了，还好吧，没出现什么问题。我们用的是钢制的滤器，我的经验是，在包滤器的时候，和泵连接的管口及滤液的出口不要包的太紧，否则在灭菌后的冷却过程中，压力不平衡，膜很容易坏的。

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