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标题: 【求助】关于PBS配方及浓度的问题 [打印本页]

作者: nut6694 时间: 2012-11-3 15:28 标题: 【求助】关于PBS配方及浓度的问题

我看到有不少关于PBS的配方，愈加迷惑：
1、《分子克隆》上的PBS配方——NaCl 8g，KCl 0.2g, Na2HPO4 1.44g, KH2PO4 0.24g,是指多大浓度的PBS？0.15M、0.05M还是0.01M?是指哪几种离子的浓度????
2、看见过一种0.01M PBS的配方:NaCl 17.5g， NaH2PO4 .2H2O 2.96g, Na2HPO4.12H2O 29g,是否正确????

作者: u234 时间: 2012-11-3 15:28

1.指的是0.01M的，就磷酸根而言的，10mM Na2HPO4+2mM KH2PO4
2.磷酸根的浓度是19mM NaH2PO4 .2H2O ＋8mM Na2HPO4.12H2O ，而且没有K，

应该《分子克隆》上的配方是没问题的，我一直这么配的，用得很好

作者: rxcc33 时间: 2012-11-3 15:46

请问0.01M的磷酸盐缓冲液怎么配，做免疫组化用的，谢谢！急！！！

作者: 66小飞侠 时间: 2012-11-3 15:47

很简单，我做过不少组化了。如下：
Nacl 8 g/L,
Kcl 0.2 g/L,
Na2HPO4 1.44 g/L (若为Na2HPO4*12H2O 则2.9g/L ),
青、链霉素各100 u/ml,
Hcl调节PH至7.2分装，消毒

作者: kuohao17 时间: 2012-11-3 15:47

你说的分子克隆上面的PBS指的时0.01M,它指的是溶液的浓度

作者: hold住 时间: 2012-11-3 15:47

啊，各位大侠，请问一下，司徒镇强主编的细胞培养怎么和上面的不一样，
NaCl 8g，KCl 0.2g, Na2HPO4 1.５６g, KH2PO4 ０.２g

作者: bling 时间: 2012-11-3 15:48

谈谈我对这个问题的看法：
我觉得里面的盐是为了保持一个恒定的渗透压，所以它的组成其实并不是很重要，也无所谓是钠盐还是钾盐，当然关于缓冲液的浓度，取决于起到缓冲作用的离子的浓度，也就是HPO4, H2PO4 的浓度了，如二层楼主所言。

作者: qqq111 时间: 2012-11-3 15:49

我们实验室是这样配的：
1. 先配好0.1M的PB1000ml。（磷酸二氢钠2.96g,磷酸氢二钠 28.7g,加双蒸水至1000ml）
2.称取40g多聚甲醛，放如广口瓶中，加入适量的0.1M的PB，摇晃后放入微波炉中，用微火加热两分钟，然后拿出摇匀，如没有熔化，再放如加热两分钟，直到融化为止。（瓶子一定要用牛皮纸包好，不然很难闻。一定要用温火，不要煮沸了。）
3.冷却后用滤纸过滤，最后用0.1M的PB定容至1000ml,既为4%的多聚甲醛。
*.如果双蒸水没有，配0.1M的PB时也可以用去离子水，我们实验室都是这摸配的，没有任何问题。

现在博士德和中山公司都有配好的粉末出售，买来直接加到1000ml双蒸水就行了，非常方便！！大家可以试一试！
GOOD LUCK！！

作者: orangecake 时间: 2012-11-3 15:49

PBS母液配方

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作者: orangecake 时间: 2012-11-3 15:50

0.1的PBS

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作者: PINK 时间: 2012-11-3 15:51

我曾经也碰到过这样的一个问题，
关于磷酸盐缓冲液的浓度，其实就是磷酸根缓冲对的浓度，也就是溶液中的Na2HPO4以及NaH2PO4中磷酸根的浓度。另外，还有NaCl的浓度也很重要。主要是调节渗透压的作用。
关于具体的配方，其实有很多种。我整理了一下，觉得下面的两种还是比较不错的。

0.01 M PBS工作液所需原料 5000ml 1000ml
Na2HPO4•12H2O磷酸氢二钠克 13.42g 2.684
NaH2PO4•2H2O 磷酸二氢钠克 1.95g 0.39
NaCl 克 42.5g 8.5
三蒸水毫升 5000ml 1000

是工作浓度，根据自己的要求配浓缩液，关键是pH，一定要调在7.4左右，pH可以用NaOH和盐酸调。

我在实验中用了很多次还是挺不错的。

作者: jujuba 时间: 2012-11-3 15:52

NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4•H2O 1.56g，KH2PO4 0. 2g 倒入盛有双蒸水的烧杯中，玻璃棒搅动，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml，摇匀即成新配制的PBS溶液。

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