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标题: 【求助】请教ＤＭＳＯ！ [打印本页]

作者: am10 时间: 2012-11-10 12:47 标题: 【求助】请教ＤＭＳＯ！

我用ＤＭＳＯ溶解中药后，再稀释结果药全析出来了。我是１ml的DMSO溶解后，加９ml的生理盐水，本想以此作为母液，做的时候再培养液稀释到所需浓度。谁知全析出来了，浪费了好多。
我想问一下各位大虾是怎么做的？出现过这种情况吗？　　　　　　　　　我想真的干预的时候，培养液与ＤＭＳＯ的体积比远大于９：１，也就是说ＤＭＳＯ的浓度更稀，岂不是析的更多？
还有ＤＭＳＯ不能直接往细胞里加，会放热，那该怎么办呢？

问题太多，谢谢大家帮忙！！！

作者: ladyhuahua 时间: 2012-11-10 12:48

我想真的干预的时候，培养液与ＤＭＳＯ的体积比远大于９：１，也就是说ＤＭＳＯ的浓度更稀，岂不是析的更多？

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但是，你也别忘了这时候，药物的浓度也被稀释了很多哦。
如果，配不了太高浓度的母液，那么，你只有把母液浓度调低一些，一般原则上，是使培养液中终浓度的DMSO不超过0.1%，当然也有人说0.5%的，可以参考这个帖子。显然你的母液浓度配得实在太高了。我们一般都加几百微升的DMSO，逐渐加上去的。另外，最后加药的时候，你可以用培养基来稀释药物。
DMSO直接往细胞里加会放热吗？这个我还真不知道呢？不过，应该是不会的吧，否则冻存细胞采用10-20%的DMSO浓度，那不是把细胞全烧死了吗？呵呵！
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=1093757&sty=3&keywords=DMSO%C5%A8%B6%C8')

作者: qqq111 时间: 2012-11-10 12:49

DMSO加到培养基中是会放热的！冻存的时候应该要先将含DMSO的冻存液预冷至4度，这时候DMSO对细胞的毒性也是最小的

作者: qqq111 时间: 2012-11-10 12:49

我们一般用DMSO配置200*的原液，终浓度0.5%，加药的时候，平皿倾斜，在叶面最高处加药，这样距离细胞会远也，加入后立即混匀，避免局部浓度过高。有时候，有一些沉淀关系不大。

作者: DNA 时间: 2012-11-10 12:51

沉淀析出，也就是药析出来了，怎么会没影响呢？怎么才能保证没沉淀呢？是不是DMSO的终浓度越低越好？

作者: mysmdbl 时间: 2012-11-10 12:51

DMSO跟水是互溶的，一般药物溶解在DMSO中以后，再用水溶剂稀释的话，应该不会析出的。你的药物析出会不会还有其他的问题。
另外，我做实验的时候也曾经遇到DMSO加到完全培养基里时溶液温度上升，可能真的存在放热的问题。

作者: lgm 时间: 2012-11-10 12:51

你为什么要用生理盐水稀释药物呢，细胞培养中有用审理盐水的吗？

作者: lgm 时间: 2012-11-10 12:52

另外是否能溶解主要是物理和化学的问题，先要知道你的药物主要的物理化学性质，蛋白质类与盐溶液混合可能析出沉淀（盐析），盐水中含钠氯，你的药物中含有的离子成分是否有关系，不会含银吧

作者: 小糖块 时间: 2012-11-10 12:52

DMSO加入细胞确实会放热，我曾经用DMSO稀释药物以后静脉腹腔注射大鼠，结果大鼠一会就死掉了，可惜呀。

至于析出，药物是不是能够在DMSO中完全与药物本身的特性有关，我认为要逐渐加入DMSO，当药物完全溶解后停止。试验时用培养基稀释，由于DMSO与水是可以混溶的，大比例稀释的情况下应该没有析出。

我的实验就是这样。

作者: eric930 时间: 2012-11-10 12:53

看看我说的对不？
第一：用DMSO来降低储存液的浓度肯定不行，储存液一般必须高浓度，否则影响药物保存期。而且，DMSO浓度高了对实验也是有不良影响的。
第二：药物要求用DMSO溶解，说明在水中溶解度差一些。要把含有药物的DMSO1ml一下加入9ml水里，药物必然析出。应该这样，取水0.5ml放入一个离心管，然后向其内加含有药物的DMSO1ml，并吹打，至无沉淀，再向其内加水8.5ml，这样药物就不会析出，别看都是一样的量，加的方法不一样，效果大不相同啊。
虽然是细节问题，对实验却是很重要的。
这是我百试不爽的方法，对于有类似问题的战友会有帮助吧？呵呵。因此斗胆要求斑竹给加分鼓励，呵呵。

作者: jrwyyplt 时间: 2012-11-10 12:53

我觉得你这个方法是即用即配型的，时间久了还是会析出的。所以用作为母液，应该全用DMSO，保存时间长，又不会析出

作者: whitesheep 时间: 2012-11-10 12:55

母液当然是全用DMSO了，我没说明白吧？那位朋友不是说他不会储存，而是临用的时候药物自DMSO中析出，我教的就是怎么不让药物析出啊。

作者: 04906 时间: 2012-11-10 12:56

我也碰见过这种情况，我想这是你的药物的水溶性低造成的。
而且，我更惨，因为我的药物只能用20％以下的DMSO溶，不然我的病毒就不保了！
大灵通，不知你的那个方法灵不灵？

作者: orangecake 时间: 2012-11-10 12:56

我说一上,一般我们是将药物配成100mg/ml的DMSO母液,用时10ml培养液中加入10微升或更少的量,能溶解的药可迅速溶解,但也有很多药加入后马上析出沉淀,只好于超声波清洗器中超声几分钟,能溶解的也就溶了,不能溶的只能混悬起来.
可能还有更好的办法,但要靠做药物制剂的同志们来解决,比较麻烦,另外所加助溶剂也可能对细胞有影响.
我发现用SIGMA的DMSO终浓度达0.05%时对10多种细胞均未发现明显影响,但国产的DMSO好象不太好.

作者: 04906 时间: 2012-11-10 12:56

我的意思是，从我做的一些常规的细胞试验看，对于贴壁细胞，少量的沉淀，细胞毒性试验等试验的结果并不受太大影响，没有太大偏差。

作者: mimili_901 时间: 2012-11-10 12:57

请问大家DMSO配的药物怎么保存？我放在4度冰箱里，结果都结冰了。这样对药效有影响吗？

作者: kuaizige 时间: 2012-11-10 12:57

药物一般都是放在室温保存的，放在4度冰箱中温度降低肯定溶解度也会降低的，所以就可能析出！而且和容易结冰了，结冰的话说明你用DMSO配药时是否加别的液体了，单纯DMSO应该不会结冰的！
你以后放在室温保存就可以了！

作者: bling 时间: 2012-11-10 12:58

不知道你溶解什么中药成分呢?我用DMSO溶解过银杏叶提取物GBE,也曾经遇到过类似的情况并且DMSO的浓度为0.1%(这样才不会对细胞产生影响),起初用纯的DMSO能够全溶解,但稀释后就析出,后来我找到了一个好办法使GBE完全溶解了,很简单:高压加热15磅,20分钟.然后就溶解了,4度冰箱中不析出.通过后来的实验证明这种方法促溶后对细胞没有影响,GBE能够起到保护神经元的作用.你不妨试一试啊!

作者: xueyouzhang 时间: 2012-11-10 12:58

因为DMSO是水溶，当然要产热了，所以你使用时要预冷

作者: yychen 时间: 2012-11-10 12:59

预冷后的DMSO溶解药物会更容易析出，我看如果使用浓度不高，不如直接用DMSO配制，使用时直接加入稀释液中即可，千万不要放置在4度

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