分析测试百科

标题: 【求助】发新话题回复话题【求助】 [打印本页]

作者: fsdd817 时间: 2013-1-5 16:55 标题: 【求助】发新话题回复话题【求助】

如题，因为我师兄之前冻存的SW480细胞冻存液比例是DMEM：FBS：DMSO=7:2:1，我复苏九瓶只活了一瓶，最后还不小心污染了（呵呵真不好意思），但是HCT116细胞全部复苏活了（也是配的这个比例的冻存液）。
我在网上看到别人说SW480和Lovo细胞冻存液比例应该为培养基：DMSO=95%：5%，不知道他的培养基是指完全的还是什么，也不知这个方法是否可行，求指教~~~

作者: gogo 时间: 2013-1-5 16:56

相关疾病：
肿瘤
细胞英文名称 SW480 [SW 480；SW-480] 细胞中文名人结直肠腺癌细胞
形态特性上皮样生长特性贴壁生长　
特征特性 SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌，而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。该细胞CSAp和直肠抗原3阴性；角蛋白阳性；p53基因第273位密码子的G →A突变引起Arg→His替代，309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代；细胞p53蛋白表达水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis 和fos的表达呈阳性；未检测到癌基因N-myc的表达；不表达Matrilysin（一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶）。有报道称该细胞表达GM-CSF。ras
培养基 IMDM: Iscove＇s Modiefied Dulbecco＇s Medium
血清 10%FBS　其它因子无
传代方法 1:2~1:8传代；1~2天换液1次。传代情况 C4
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

细胞英文名称 LoVo 细胞中文名人结直肠腺癌细胞
形态特性上皮样生长特性贴壁生长　
特征特性该细胞是1971年从诊断为结肠腺癌的56岁白人男性的一个左锁骨上区的转移灶建系的。癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb和fos的表达呈阳性；未检测到sis和N-myc的表达。它在裸鼠中能成瘤；表达肿瘤特异的核基质蛋白蛋白CC-3和CC-4。
培养基 F12K
血清 10%FBS　其它因子无
传代方法 1:3~1:10传代；2~3天换液1次。传代情况 C3
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

作者: caihong 时间: 2013-1-5 16:57

QUOTE:

原帖由 gogo 于 2013-1-5 16:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
相关疾病：
肿瘤
细胞英文名称 SW480 [SW 480；SW-480] 细胞中文名人结直肠腺癌细胞
形态特性上皮样生长特性贴壁生长　
特征特性 SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌，而SW620源自同一病人一年后的淋巴结 ...

相关疾病：肿瘤
我就说冻存液配制有问题，大侠，无限感谢啊呵呵~~

作者: caihong 时间: 2013-1-5 16:57

老师想问一下 CACO-2 冻存条件感谢啊呵呵~~

作者: xingyi08 时间: 2013-1-5 16:58

相关疾病：
结肠癌
老师就免了,查细胞和培养基信息可以找我.
细胞英文名称 Caco-2 细胞中文名人结直肠腺癌细胞
形态特性上皮样　生长特性贴壁生长　
特征特性此细胞株分离自一个原发性结肠癌。当细胞长满时，表现出典型的肠细胞分化的特征。Caco-2细胞表达维生素A酸结合蛋白I和视黄醇结合蛋白II，角蛋白阳性。
培养基 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)
血清 20%FBS　其它因子 1%NEAA+10mM Hepes　
传代方法 1:4~1:6传代，细胞达80%汇合时进行传代；每周1~2次换液。传代情况 P27
冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS　支原体检测阴性　
同工酶　染色体 85~90，91~100

作者: 66小飞侠 时间: 2013-1-5 16:58

你好，请问Caco-2用DMEM+10%FBS养行吗？别的成分都加。是不是一定要20%的FBS？我养的长得很慢。

作者: glass 时间: 2013-1-5 16:59

我也在养，我说下哈，我原来是用20%养的，现在用10%养也挺好，反正两种用起来都长得慢，养久了长得就好点了~~还有，我原来是这样的，细胞长得慢飘的多我就换液换的勤，后来发现这样更不好，现在换的不怎么勤，长得还好一点！

作者: c86v 时间: 2013-1-5 17:04

我现在也在养Caco2这种细胞，早在买细胞之前就听说很难养，我们是7.7号细胞才到，当晚就传代了，发现细胞贴壁有点慢，两天才换的液，培养基是DMEM+15%胎牛血清，细胞长得很慢。想请教各位高手这种细胞应该怎么养啊，多谢赐教！

作者: zsxan1990 时间: 2013-1-5 17:05

长的快就不是Caco-2了

作者: fei1226com 时间: 2013-1-5 17:05

我现在也在养Caco2这种细胞，早在买细胞之前就听说很难养，我们是7.7号细胞才到，当晚就传代了，发现细胞贴壁有点慢，两天才换的液，培养基是DMEM+15%胎牛血清，细胞长得很慢。想请教各位高手这种细胞应该怎么养啊，多谢赐教！

=============================================================================================================

这种细胞嘛，虽然我没用过它，但是养了很久，知道一点它的性格，开始的时候长得比较慢（就是相对于正常时更慢），而且聚在一起很烦，后来我分瓶的时候不再离心了，胰酶快消化的时候倒掉大量，用含血清培养基吹打致细胞团多次（我觉得可以猛吹打），分瓶装就行了，最后一点就是一个礼拜换两次液左右就行了，勤换液好像也没啥用！10%就够了！

作者: fei1226com 时间: 2013-1-5 17:06

长的快就不是Caco-2了

=======================================

是的，而且看起来，这种细胞好巨大哦~呵呵

作者: 阿司匹林 时间: 2013-1-5 17:06

哦，你一周换一两次液啊，那多久传代啦？我昨天看了一下细胞才4天都快传代了，不过其他养细胞的同学说还可以再养一两天，于是决定今天去传代！另外，我想请问一下，像Caco2、HT29、SW480细胞状态怎么判定啊？因为好像觉得这些细胞跟其他细胞不一样！

作者: fei1226com 时间: 2013-1-5 17:07

哦，你一周换一两次液啊，那多久传代啦？我昨天看了一下细胞才4天都快传代了，不过其他养细胞的同学说还可以再养一两天，于是决定今天去传代！另外，我想请问一下，像Caco2、HT29、SW480细胞状态怎么判定啊？因为好像觉得这些细胞跟其他细胞不一样！

==============================================================================================================

细胞状态好都是亮堂堂的，SW480像蜘蛛网一样趴着，HT-29就普通型圆溜溜铺的很满，caco-2比较二逼，大的很而且聚在一起，如果保持这种状态就是很好~~

作者: mamamiya 时间: 2013-1-5 17:08

楼上2位前辈你们好，我的caco2细胞不小心给弄死完了，很悲催，老板那不好交代，可否行个方便啊，我的电话是15902739257 QQ是454469412，求求你们了，再买的话好贵，可不可以优惠我点啊

作者: dog002 时间: 2013-1-5 17:08

你好，我想问下这两种细胞的转染效率怎么样啊？

欢迎光临分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)