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标题: 【求助】流式检测细胞凋亡 [打印本页]

作者: XYZQ 时间: 2013-1-8 13:53 标题: 【求助】流式检测细胞凋亡

求助高手：
请问流式细胞图如何看，怎样从图中知道细胞凋亡的情况

作者: finger 时间: 2013-1-8 13:53

这要视不同的方法做流式细胞图而定。
如用PI单染已固定的细胞(即细胞周期分析)，则在G0/G1峰前的Sub-G0峰即为细胞凋亡峰；而对于Annex V-FITC/PI双染，则由FITC染色的两个象限的细胞都可作为凋亡细胞，一般认为右下为早期凋亡，右上为中晚期凋亡。
有具体问题再问吧。
GOOD LUCK!

作者: bamboo16 时间: 2013-1-8 13:54

好多死细胞也在右上象限的，左上的evens为细胞碎片。

作者: lxh031 时间: 2013-1-8 13:54

经典地讲，右上象限是晚期凋亡细胞，而左上象限为死亡细胞及其碎片。

作者: INK 时间: 2013-1-8 13:55

同意楼上说法, 前提是ANNEXIN V为X轴, 另外, 可以通过FSC/SSC的Gating将碎片去除.

作者: XYZQ 时间: 2013-1-8 13:55

我做的经过药物处理后的细胞怎么基本上都处于晚期凋亡啊，为什么早期调亡细胞很少啊？

作者: owanaka 时间: 2013-1-8 13:56

1、注意药物浓度浓度及作用时间
2、注意后处理对细胞的损伤，特别是对细胞膜完整性的破坏，导致PI进入细胞，呈现晚期凋亡现象。

作者: 49888 时间: 2013-1-8 13:56

ANNEXIN V为X轴, PI为Y轴，右下为早期凋亡，右上为中晚期凋亡，左上为死亡的细胞

作者: plaa 时间: 2013-1-8 13:56

1、注意药物浓度浓度及作用时间
2、注意后处理对细胞的损伤，特别是对细胞膜完整性的破坏，导致PI进入细胞，呈现晚期凋亡现象。
请问你的第2条后处理究竟应该怎么样避免？你应该指的是收集细胞时吧？我很想请教这个过程，作好几次流失了。就是凋亡率太低，请指教。谢谢

作者: 49888 时间: 2013-1-8 13:57

避免对细胞的损伤主要要注意离心力不要过大，洗涤液、缓冲液等要等渗，pH合适，吹打时不要太激烈，等。
如果你一直凋亡率太低的话，选一个阳性药物参照一下，以判断是操作上的问题还是药物本身的问题。

作者: 阿k 时间: 2013-1-8 13:57

为什么药物组我的左上象限的细胞就是坏死细胞的好多。是因为我收集过程的问题？还有就是用细胞刮会照成什么结果？

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