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标题: DTT会连在巯基上吗 [打印本页]

作者: 紫菁 时间: 2009-11-27 15:45 标题: DTT会连在巯基上吗

我的包涵体溶在8M脲中，然后加DTT还原，然后质谱，发现加DTT的比不加DTT的质荷比要多100左右，这是为什么呢？DTT会连在游离巯基上吗？

作者: 358uwcj 时间: 2009-11-27 21:11

8M脲能直接质谱吗？

作者: 实验技术 时间: 2009-11-28 09:45 标题: 回复 #1 紫菁的帖子

应该不会连的。。你用的是什么质谱啊。。。用飞行时间质谱就完全不会出现这种情况。。你可加半胱氨酸试试。。

作者: nihao123 时间: 2009-11-28 10:15

没遇到过这样的情况哎，应该不会连吧

作者: 紫菁 时间: 2009-11-28 16:42

我用的就是MALDI-TOF啊，做了几次都比未加DTT的大。不知啥原因，请高手指教！

作者: ncba 时间: 2010-6-18 08:37

在还原的过程中， DTT有可能加和在蛋白上，反应时间足够长之后， DTT的加合物会消失。
可参考用电喷雾质谱法监测重组人肿瘤坏死因子(rhTNF)中二硫键的还原过程，分析测试学报,1999,18（3）：56-58.

作者: dumiao123 时间: 2010-6-25 16:49

不会的,是你的二流键打开,与其他东西反应了,也就是你打开的二流键被修饰了，

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