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标题: 【求助】HIF-1a的分子量到底是多少？ [打印本页]

作者: +小生怕怕+ 时间: 2013-5-31 15:58 标题: 【求助】HIF-1a的分子量到底是多少？

HIF-1a的分子量到底是多少？有人做组织中提取的HIF-1A的WB么？

作者: abc816 时间: 2013-5-31 15:58

兄弟好我在做肾脏组织的HIF-1a 它的分子量是120Kd。。。
有机会多多交流

作者: +小生怕怕+ 时间: 2013-5-31 15:59

我买了一个ABCOM 的一抗，怎么上面显示的是93KD呢？

作者: wood533 时间: 2013-5-31 15:59

HIF-1α的预测分子量为93kD，在变性充分的情况下可以检测到93kD的HIF-1α条带，在很多情况下可以检测到分子量为120kD左右的HIF-1α条带，原因不详。

作者: redbutterfly 时间: 2013-5-31 16:00

相关疾病：
肝癌
我在做肝癌组织中HIF-1α的WB，多交流。
我买的R&D的抗体，说明书上条带显示分子量在120KD左右。

作者: 30moonriver 时间: 2013-5-31 16:00

怎么每个人有每个人的说法啊？我查出来的资料说是132KD,干将莫邪是苏大这边的吗，你要做HIF-1A的WESTERN吗？

作者: IAM007 时间: 2013-5-31 16:01

我做过骨骼肌组织的HIF-1a，分子量100K左右

作者: qianqin1977 时间: 2013-5-31 16:03

你好，你现在HIF-1A的WESTERN 做出来了吗？

作者: +小生怕怕+ 时间: 2013-5-31 16:05

还没做呢，现做的是其他的指标的检测

作者: xue258 时间: 2013-5-31 16:53

我做细胞的是120KD ,但是条带不清楚,我用的是快速提取蛋白法,大家有没有好办法做出来的?

作者: 33号 时间: 2013-5-31 16:54

似乎在做此指标的战友都做的不是很理想回复一下希望有高人指点啊呵呵

作者: +小生怕怕+ 时间: 2013-5-31 16:55

我做了几次，都没做出来啊，虽然在胶及转膜后的膜染色，在120KD左右都有很清晰的但是很细的条带，结果就是不出啊

作者: 89tongzijun 时间: 2013-5-31 16:55

我也做hif-1a，查过几个公司，对于它的分子量也是说法不一，但是文献上大多只说在120kd。我现在也主要检测这个位置的条带，暂时不是太理想。

建议你孵抗体之前裁膜裁的宽一些，因为我们有经验就actin在跑不同浓度的分离胶的时候，它有时就在marker上面，有时就在下面，说不好什么原因。最好不要因为裁的膜过窄把目的条带裁下去了。

ps：你用的哪个公司的抗体啊？

作者: jrwyyplt 时间: 2013-5-31 16:56

我做了几次，基本上都有条带的，在130KD 左右。

作者: summerxx 时间: 2013-5-31 16:57

楼上的你好啊我也在做这个指标我做出来目的条带也是在130kd左右
还以为是假的呢都怀疑预染的蛋白marker是不是不准确了
现在知道你也是这种情况就放心多了多多交流

作者: wood533 时间: 2013-5-31 16:58

我后来做的不是条带不出来，就是没有趋势，能否交流下细胞裂解液的配方，电泳，转膜的条件？？谢谢

作者: wsll 时间: 2013-5-31 16:58

刚做完了,HIF-1BETA出来了,就是HIF-1ALPHA出不来,到底怎么回事?

作者: 831226 时间: 2013-5-31 17:04

呵呵，前段时间也一直在纠结这个蛋白的wb，最近两天用HepG2细胞经过CoCl2处理以后发现结果还行，就是有个问题，低浓度的Cocl2处理Hif1a多，比control多不少，而高浓度处理24小时反而一点都没有了，奇怪。另外我用的是Abcam的一抗，1：2000，目的分子量约为120，背景还算干净。

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