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标题: 氨基酸含量检测的时候测定的是产品中游离氨基酸含量吗？ [打印本页]

作者: 化小样 时间: 2013-6-22 15:43 标题: 氨基酸含量检测的时候测定的是产品中游离氨基酸含量吗？

如题，氨基酸含量检测的时候测定的是产品中游离氨基酸含量吗？这种含量是蛋白质完全水解得到的吗？还是部分水解+产品中原来含有的游离氨基酸含量？有没有人知道呢？

作者: 明灰灰 时间: 2013-6-22 15:44

盐酸水解法之后氨基酸自动分析的话是测定总的氨基酸包括游离氨基酸，茚三酮比色法测定的一般是总的游离氨基酸，而分离蛋白或者限制蛋白水解条件下进行高效液相色谱分析测定的是各游离氨基酸的含量

作者: 誓言@谎言 时间: 2013-6-22 15:47

如果把蛋白质沉淀分离掉，然后进行柱前衍生或者氨基酸自动分析仪就是分析的产品原来含有的游离氨基酸的含量，而加盐酸水解之后测定的氨基酸是完全水解+产品原来含有的游离氨基酸，因为水解条件都是经过反复试验优化得来的，应该说是完全水解的了

作者: 甜甜TVT 时间: 2013-6-22 15:52

因为自己也做氨基酸,我来总结一下LS的观点.
1.6N盐酸水解一天后的产物为总氨基酸
2.不水解只稀释定容的方法为游离氨基酸

由于氨基酸在检测器中的相应问题需要进行衍生化.
目前的衍生化分为柱前衍生和柱后衍生两种.
楼上提到的日立8900氨基酸自动分析仪是柱后茚三酮衍生法.此法有一根分离柱和一根反应柱,反应柱后接UV检测器.
柱前衍生我喜欢用PITC衍生,这种衍生方法仅需要一根氨基酸分离柱即可,检测器也是UV检测器

作者: mico_11 时间: 2013-6-22 15:55

大部分方法（除凯氏定氮法）测定的都是游离氨基酸含量。至于是不是水解得到的这个就不一定了，一般氨基酸的存在形式有两种，一种是游离态，一种是结合到蛋白质中，如果你限制了蛋白质水解或除去了蛋白，那全部就是游离氨基酸。反之就是部分水解+产品中原来含有的游离氨基酸含量。我想你应该根据自己的测定目标，设定试验条件。希望对你有用。PS，有些氨基酸只有游离态一种形式，即非蛋白组成氨基酸。

作者: 花花 时间: 2013-6-22 15:59

看样品前处理，如果上柱前通过酸水解一夜，就是蛋白样品被彻底水解率，测量的就是全部游离的氨基酸含量，据我所知，一般跑柱子测的都是游离氨基酸的含量

作者: 读过书的 时间: 2013-6-22 16:03

用的是什么方法测氨基酸的含量一般在测定前要对样品进行消化使蛋白质水解

作者: fantacy 时间: 2013-6-22 16:07

用6mol/L的盐酸浸泡过夜，一般14-20个小时，在烘箱中110度放置就可以了，我们测的是二十种氨基酸

作者: hey_bye 时间: 2013-6-22 16:12

要测氨基酸总量还是要测出种类和含量？
你是做什么样品呢? 一般酸水解之后剩下的油脂怎么办?

作者: 青青子衿 时间: 2013-6-22 16:18

用的8900氨基酸分析仪如果测游离直接定容过滤进样就行如果是总氨基酸需要先酸水解20个小时然后蒸干定容过滤进样

作者: 兜兜 时间: 2013-6-22 16:21

一般要做柱前衍生，如果不做，则结果不准
个人观点仅供参考

作者: mr.henry 时间: 2013-6-22 16:26

那请问这样6mol/L的盐酸浸泡过夜的测得的含量其实是将蛋白质都水解后的测得总氨基酸呢？

作者: 娜爷~ 时间: 2013-6-22 16:31

请问 110度放置后然后需要晾干和过膜么？

作者: 小书虫 时间: 2013-6-22 16:34

我做草莓的游离氨基酸含量分析，用的是日立8900氨基酸自动分析仪，标样的图谱很好，可是样品的图谱峰分离不开，不知道是怎么回事。我的方法是：草莓磨碎后取汁液，处理，定容，取样，过滤膜过滤，测定；测定方法就是用工程师培训时讲解的方法条件，没有另外更改。不知道怎样能使样品的各个峰分开。谢谢大家的解惑！！！

作者: outeer 时间: 2013-6-22 16:38

我觉得你样品出峰根本不是氨基酸,因为出峰时间跟你标品的出峰时间对不上,而且基线相当差,感觉像是色素的吸收峰.

建议可以做盐酸水解试试看,PS.草莓含水量很高,建议加大样品量去水解.然后真空干燥去风味成分

作者: lililala6868 时间: 2023-7-20 15:01 标题: 9821

谢谢分享

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作者: chenzhen2016 时间: 2023-7-23 14:44

氨基酸含量检测通常是测定产品中的游离氨基酸含量。游离氨基酸是指在水解过程中，蛋白质被完全水解或部分水解后，其中的氨基酸以游离形式存在，而不是被其他化合物或结构所包围。游离氨基酸是蛋白质分解后最基本的单元，也是人体吸收和利用蛋白质的主要形式。

在氨基酸含量检测中，通常使用一些分析方法（例如高效液相色谱法，或气相色谱法等）来测量产品中的游离氨基酸含量。这些方法可以准确地测定各种氨基酸的含量，从而帮助人们了解产品的蛋白质成分。

对于产品中的氨基酸含量，它可能是来自两种来源：

完全水解：如果产品是经过完全水解的蛋白质，那么其中的蛋白质已被分解成单个氨基酸，而不含有多肽或蛋白质的结构。在这种情况下，测得的氨基酸含量主要是游离氨基酸的含量。

部分水解+原有含量：有些产品可能并非经过完全水解，而是经过部分水解得到的。此时，产品中可能含有游离氨基酸和部分水解的多肽或肽链。在这种情况下，测得的氨基酸含量包含了游离氨基酸和部分水解产生的氨基酸。

需要注意的是，不同的检测方法和实验条件可能会导致结果的差异。因此，在进行氨基酸含量检测时，需要使用准确可靠的分析方法，并对实验进行严格的控制，以确保结果的准确性和可靠性。

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