标题:
也有峰,但是纯品太少,没办法富集求助
[打印本页]
作者:
80年代的人
时间:
2013-7-28 22:09
标题:
也有峰,但是纯品太少,没办法富集求助
转载
现在在做食用菌子实体多糖的分离纯化,我用的是DEAE-52的纤维素柱,用0.05到0.5的NaCl 梯度洗脱,1.25ml/min,上样量是1mg/ml 的多糖10ml,每管收集5ml,过了两次,也有峰,但是纯品太少,没办法富集,还想拿到纯品,怎么办呢?
作者:
be!smile
时间:
2013-7-28 22:10
多糖醇沉的时候确实有两层上面漂浮的一层是胶体状的,下面一层是沉淀。胶体状的我没做过,我做的是下面的沉淀
作者:
#断点#
时间:
2013-7-28 22:14
柱子的规格。如果想大量的制备,当然是选择稍稍大的柱子。直径在2.0cm以上。你上样量。可以稍稍加大点多糖的上样量。
作者:
疲惫黑眼圈
时间:
2013-7-28 22:17
多糖的浓度。你上样上了10ml。尽量减小上样体积,提高多糖浓度。
作者:
艾玛@加油
时间:
2013-7-28 22:21
梯度洗脱的浓度选择。0.05-0.5这个浓度,你是随便选择的。什么浓度是最适合的,是需要实验依据的。你有两种方案选择:1、阶段性梯度洗脱:洗脱液的浓度从0、到2mol/L,选择适当的不同浓度,有低到高依次洗脱并分别收集。2、线性连续性梯度洗脱:洗脱浓度是从0-2mol/L,成线性、连续性洗脱,这种线性浓度你可以在去离子水中一边接入柱子,一边同时匀速加入高浓度的洗脱液2mol/L,同时不断搅拌(磁力搅拌器),使溶液浓度从0慢慢逐步提高。
作者:
=心晴=
时间:
2013-7-28 23:10
你要对以上收集的收集液,逐管或者隔管检测多糖含量,从而来确定主峰的位置。以便选择适当的洗脱浓度,从而优化实验参数。
细心、耐心加毅力。
祝你试验成功。
作者:
不化妆的lay
时间:
2013-7-28 23:14
非应助,自己也是在学习中,DE52不耐压,如果加大盐离子浓度可以不?不梯度洗脱,直接用一较高盐离子浓度洗脱液洗脱
作者:
哦买噶
时间:
2013-7-28 23:19
做过氧化值时,淀粉指示剂的加入时机对分析结果的影响是比较大的
作者:
集贤阁
时间:
2013-7-28 23:23
直接做油还是做食品中提取出来的油?如果是后者的话提取过程很重要,前者的话样品做前摇过吧,实验应该比较简单,我做过很多年火腿中过氧化值和酸价,对提取好后的油平行性很好。
作者:
哈达
时间:
2013-7-28 23:26
这很正常,真菌多糖很多都是胶体,建议加热或盐溶液溶解,每次用一种洗脱液都有一个峰也很正常,主要是看哪个峰是主要成分,不知道你的柱子规格,一次进样10mg是有点少,需要很长时间才能得到足够的量啊,呵呵
作者:
哈达
时间:
2013-7-28 23:27
关于微胶囊化油脂方面对研究,总油测定是最基本的一点。根据微胶囊壁材种类先判定其破壁条件,然后才可以萃取得到里面的油脂,计算总油含量。一般来说,工业上常用的微胶囊壁材主要有变性淀粉和蛋白类。楼上很多人提供的方法,比如酸水解和氨水处理都是针对蛋白质的,变性淀粉相对比较容易破壁,热水浸泡或结合pH调节可以达到破壁的效果。不同的壁材、乳化条件、干燥方法(喷雾干燥当然是最常见的)等等都要考虑。我推荐你看看江南大学许时婴教授指导的相关论文,CNKI上有的。
作者:
化小样
时间:
2013-7-28 23:30
看到的文献里,芯材为脂溶性的话,都是先用水溶解,然后再用乙醇,乙醚,石油醚混合液(配比是根据你自己的芯材性质决定的,参考芯材的极性),然后分多次萃取,回收萃取液烘干称重。
欢迎光临 分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)
Powered by Discuz! 5.5.0