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标题: 分享：反相液相色谱中流动相pH的确定 [打印本页]

作者: maomi530 时间: 2010-3-15 11:12 标题: 分享：反相液相色谱中流动相pH的确定

反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定

　　反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中，选择正确的缓冲液PH值，对可离解的化合物分析的重现性十分重要，不恰当的PH值可能导致不对称峰，宽峰，分裂峰或肩峰，而尖锐的，对称的峰是定量分析中获得低的检测限以，两次分析之间较低的相对标准偏差(RSD)和保留时间的高重现性的前提。我们将讨论在使用缓冲液时如何选择缓冲液的PH值，以及如何选择正确的缓冲体系。

　　什么时候需要缓冲溶液?

　　在反相液相色谱分析中，流动相的PH值一般在2.5-7之间，当被分析物在反相条件下可离解，或样品的PH值在2.5-7之外时，就需要缓冲液。在反相条件下可离解的化合物一般都有氨基和羧基，他们的Pka在1-11之间，选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团以一种形式存在，离子形式或中性化合物的形式。如果样品的PH值对柱子有伤害，则缓冲溶液可使其变温和从而减小其危害。

　　如何选择缓冲液PH值

　　在选择缓冲液PH值之前，应先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka两个PH值单位的，有助于获得好的、尖锐的峰，从HH公式：PH=Pka+log([A-]/[A])得知，溶液 PH值高于或低于Pka两个单位，化合物中99%以一种形式存在，而一种形式存在的化合物才能获得好的尖锐的峰。

　　如果选择不到合适的，样品的pKa与流动相的pH非常接近，那么流动相pH微小的变化，都会引起样品保留时间较大的变动。

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作者: 感悟人生 时间: 2010-3-15 11:20

技术含量较高，有实用，非常感谢！

作者: nancy7752 时间: 2010-3-15 11:28

谢谢LZ
文章非常有价值

作者: Roger01ws 时间: 2010-3-15 11:31

感谢，楼主提供了这么有价值的文章

作者: ccf335 时间: 2010-3-15 11:32

挺好的文献,有一定的启发

作者: gitde 时间: 2010-3-15 11:34

谢谢
对我非常有用

作者: haohaorenjia 时间: 2010-3-15 11:35

说的很有道理。很想全都看完，哈哈！！

作者: q_r_epcnge 时间: 2010-3-15 11:42

谢谢楼主，发布的资料很实用

作者: kcuw589 时间: 2010-3-15 11:44

又长知识了,谢谢~~

作者: ngoir 时间: 2010-3-15 13:43

长见识了，谢谢！顶

作者: yyid 时间: 2010-3-15 14:00

好资料啊，真有用！

作者: ghl0415 时间: 2010-3-28 20:26

反相液相色谱中流动相pH的确定

作者: zzj 时间: 2010-3-28 21:09

dddddddddddddddddd

作者: long2tong1 时间: 2010-3-29 01:53

我正需要学习这方面的东东，谢谢了。

作者: xxjc2007 时间: 2010-3-31 20:33

先看看

作者: pthqufgw 时间: 2010-4-1 10:51

很想知道PH的影响

作者: ylylttt 时间: 2010-4-1 14:34

还有一点当有机溶剂和水作流动相时,调PH 一定注意操作的连续性

先调水相PH再混合这种为最佳

作者: ren 时间: 2010-5-22 09:38

谢谢楼主

作者: wy82 时间: 2010-6-23 22:57 标题: 回复 #1 maomi530 的帖子

作者: 维拉2010 时间: 2010-7-7 11:23

很有用非常感谢

作者: ylylttt 时间: 2010-7-8 08:52

bucuo 我想知道怎么样得到某个物质的pka 呢

作者: ruanch 时间: 2010-7-15 23:22

thank you very much

作者: chuanlongzheng 时间: 2010-8-6 11:34

谢谢分享

作者: chuanlongzheng 时间: 2010-8-6 11:53

谢谢楼主

作者: jiayuanwei 时间: 2010-8-10 08:52

谢谢分享，认真学习

作者: lcyldx 时间: 2010-10-8 09:16

ant_23.GIF ant_23.GIF ant_23.GIF ant_23.GIF ant_23.GIF

作者: maiy 时间: 2010-10-9 10:57 标题: 回复 #1 maomi530 的帖子

谢谢楼主分享，学习了！

作者: gl19860312 时间: 2010-11-29 16:55

如何选择缓冲液PH值

????

作者: lepion 时间: 2010-12-5 20:33

dingdingdingding

作者: heying 时间: 2010-12-14 16:15

我想看一下

作者: ZWQ1985 时间: 2010-12-14 16:27

很有用，正在学习这方面的，非常及时。我想问一下，如果是一个PH=3.5的样品是不是不用缓冲液就可以了？
如果使用缓冲液应该选什么好点？还有缓冲液具体怎么配？谢谢

作者: cyp256 时间: 2010-12-16 08:55

多谢分享

作者: 默蓝 时间: 2010-12-16 12:52

想看完

作者: jixiaohu7223 时间: 2010-12-21 10:12

谢谢楼主。。。。。。。。

作者: wunaixi27 时间: 2010-12-22 21:28 标题: 回复 #1 maomi530 的帖子

真是受益匪浅啊~~~

作者: colcoben 时间: 2011-2-26 19:51

谢谢楼主，发布的资料很实用

作者: daisy-007 时间: 2011-3-8 23:00

长见识了，刚好做了这方面的实验用上了，呵呵

作者: xinxianzw 时间: 2011-3-9 12:30

最近才开始研究用C18柱做检测，lz的信息非常好让我摸到点门了

作者: deadog 时间: 2011-3-9 20:20

好文章谢谢楼主介绍经验

作者: 2lxjwinall 时间: 2011-3-30 21:49 标题: PH值

好贴，PH值如何确定

作者: wuhuixuanze 时间: 2011-4-6 17:55

很好，希望能少走弯路！

作者: 方方土 时间: 2011-4-7 09:58

谢谢分享

作者: axemos 时间: 2011-4-29 06:29

dddddddddddd

作者: pengcc31 时间: 2011-5-7 09:33

謝謝分享色譜的使用經驗

作者: aghuru 时间: 2011-6-19 02:31

长见识了。谢谢谢谢谢谢

作者: wtxx1014 时间: 2011-7-23 11:27

我得好好向你们学习啊

作者: asan1333 时间: 2011-7-24 19:52

学习学习

作者: 蓝色蝴蝶 时间: 2011-8-3 12:22

技术含量较高，有实用，非常感谢！

作者: 54tianxin 时间: 2011-8-7 01:12 标题: 回复 #1 maomi530 的帖子

谢谢楼主分享，学习一下

作者: 54tianxin 时间: 2011-8-8 12:32 标题: 回复 #1 maomi530 的帖子

PH值的降低有助于氨基化合物保留的减弱，减小化合物与硅胶表面硅羟基的作用，而使峰更尖锐，从表1 可值，任何缓冲液均可应用于氨基化合物的分析，但我们认为PH值等于3的磷酸钾盐最适合用于氨基化合物的分析。

图表未看到？？

作者: shangzhiyujie 时间: 2011-8-16 15:11

谢谢>很好啊

作者: shangzhiyujie 时间: 2011-8-16 15:12

真的很有用
谢谢

作者: lizhenghai282 时间: 2011-8-31 16:25

顶,学习

作者: lizhenghai282 时间: 2011-8-31 16:26

顶,学习

作者: a410731466 时间: 2011-9-1 08:21

这也要回复啊

作者: xq789 时间: 2011-10-23 20:54 标题: 术含量较高，有实用，非常感谢！

术含量较高，有实用，非常感谢！

作者: liumingyi 时间: 2011-10-27 09:08

谢谢楼主,刚想学习学习相关知识

作者: 煎鹅蛋 时间: 2011-11-12 16:04

作者: thp2001ywtk 时间: 2011-11-16 16:01

来学习学习

作者: menghuan1113 时间: 2013-4-9 08:18 标题: 反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定

很有用，学习了，谢谢楼主。

图片附件: [1] Sunset.jpg (2013-4-9 08:18, 69.52 KB) / 该附件被下载次数 21
http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=15577

作者: 冰冷的冰 时间: 2013-6-13 14:01

谢谢楼主

作者: lyl00 时间: 2013-6-28 22:24

很有用，谢谢！！！！！

作者: xueyanling 时间: 2013-7-13 22:03

很有用！谢谢！

作者: jordanlau 时间: 2013-8-26 16:03 标题: 回复 #1 maomi530 的帖子

很实用，正好需要做实验。。

作者: yanyy75 时间: 2013-11-14 18:55 标题: 回复 #9 kcuw589 的帖子

很实用，学习了，非常感谢！

作者: 平儿加油 时间: 2014-11-14 09:20

很有用的知识，谢谢楼主

作者: 那一抹秋云 时间: 2014-12-24 11:10

?????????????

作者: 15216762173 时间: 2017-9-9 11:18

长见识了，谢谢！顶

作者: 15355520301 时间: 2017-12-20 21:30

谢lz分享

作者: 15940263059 时间: 2018-11-11 17:02

想看看。

作者: 18360345451 时间: 2018-12-18 09:55

谢谢分享

作者: zwy930711 时间: 2019-3-17 13:11 标题: 回复 #1 maomi530 的帖子

很棒，有收获，谢谢分享

作者: lizna123 时间: 2020-10-12 14:03

谢谢非常有用

作者: 13388291453 时间: 2022-11-22 09:42 标题: 回复 #1 maomi530 的帖子

谢谢分享，优秀的帖子。

作者: chenzhen2016 时间: 2023-7-8 16:23

谢谢分享

作者: 14706276817 时间: 2023-9-6 15:59

学习了

:) :) :) :) :) :) :) :) :) :)

作者: 14706276817 时间: 2023-9-6 15:59

学习了

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作者: Tetrahedron_90 时间: 2023-10-7 17:32

正好用到相关知识，学习一下，感谢。

作者: 17862515140 时间: 2023-10-23 13:51

感谢分享，受益匪浅

作者: 17862515140 时间: 2023-10-23 13:52

感谢分享，受益匪浅

作者: 17862515140 时间: 2023-10-23 13:53

感谢分享，受益匪浅

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