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标题: 长出了菌，但是提不到质粒，是假阳性吗？ [打印本页]

作者: 美丽婷婷 时间: 2013-8-31 11:27 标题: 长出了菌，但是提不到质粒，是假阳性吗？

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本人做高温菌的，将氨苄抗性平板（已涂板）于55度培养4天，请问，这样氨苄会失活吗？后来长出了菌，但是提不到质粒，是假阳性吗？会不会因为氨苄失活了然后就假阳性了？麻烦有经验的大神帮帮忙

作者: 双_视野 时间: 2013-8-31 11:27

嗯，我们是做普通克隆的，一般平板在培养箱里面放16个小时左右，要是多余18个小时菌旁边就会长很多卫星菌落，后来做了对比试验，是氨苄失效了，像LZ这种情况很可能就是氨苄出问题了

作者: 莫莫莫 时间: 2013-8-31 11:41

抗生素高温很容易失效吧，可以做个对比试验
祝你好运

作者: 千里之外 时间: 2013-8-31 11:44

很容易失去活性的，建议做个对比的。好得到确定的结果

作者: grace! 时间: 2013-8-31 11:49

氨苄抗性平板（已涂板）于55度培养4天肯定失活了，因为amp在37℃放过夜都会失活，然后长出微小菌落。你放置4天长起来的菌落应该是假阳性的，接到液体里面摇菌，12个小时摇不起来就不用再摇了。
遇到这种情况最好是换种稳定点的抗生素（kana、Cl等）

作者: 巅峰时刻#-# 时间: 2013-8-31 11:54

放这么长时间肯定会失活的，氨苄青霉素属于内酰胺类抗生素，摇菌时间过长菌体会产生β－内酰胺酶破坏抗生素。做高温菌建议选用稳定性较好的抗生素或者两种抗生素筛选。

作者: hero_b 时间: 2013-8-31 11:58

高温下不能用氨苄的。得用高温下稳定的抗生素，我们常见的卡那，氯霉素等好像都不行。你是做古菌的么，常用的古菌抗生素有辛伐他汀，潮霉素等。

作者: 迷糊小鬼 时间: 2013-8-31 12:01

抗生素与高温肯定失活了。做克隆就是挺麻烦的，说顺利呢，又不顺利，不好说呢，祝lz大大实验顺利

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