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标题: 非流动相溶解的样品，出现双峰的可能原因会是什么呢？ [打印本页]

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-2 17:18 标题: 非流动相溶解的样品，出现双峰的可能原因会是什么呢？

RT
遇到过几次非流动相溶解的样品时，待测物出现双峰的情况，不是峰分叉，是很明显的两个峰。
虽然知道怎么解决，但是很想知道可能出现这种现象的原因，请各位前辈指导一下好吗？

1、出现两个保留时间相差大概5分钟的峰，第一个大概在死时间稍后一点，保留时间受流动相比例改变影响不大。但确定不是溶剂峰。
2、保留时间接近，但虽溶剂的变化，两个峰的面积也会跟着变化。

选择离子检测的。

[ 本帖最后由胖猫猫于 2010-4-3 13:19 编辑 ]

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作者: thereyoube 时间: 2010-4-2 19:42

要是用流动相溶解时，还是双峰吗？

应该是样品溶剂的洗脱能力太强

在死时间之后，而且受流动相比例改变影响不大，有可能是在柱子上保留很弱最好换方法做

流动相比例比一样，峰面积会变化的，主要是看结果是不是有变化

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-2 19:52 标题: 回复 #2 thereyoube 的帖子

感谢您的指导。
是这样的，上面1和2说的都是双峰问题，但是是两个不同的药。
1是这样的，那个药物遇到乙腈的时候，就会出现双峰，一个峰在死时间附近出，大概2点几分钟，另外一个在6分钟附近，具体时间记不清楚了。后面一个会受流动相比例的影响，但是2分钟附近出的我确定不是溶剂峰。
2是另外的药物，流动相溶解得时候是一个峰，不同比例的溶剂溶解时，会出双峰，两个峰的比例会变化的。

作者: maomi530 时间: 2010-4-3 09:24

峰分叉可能是柱子坏了，换一根试试

作者: eedc-dcnge 时间: 2010-4-3 09:28

因为你是用非流动相溶解样品的，这样样品溶液与流动相的组成不同，检测器有吸收，建议用流动相溶解样品，可以大大减小溶剂的响应，或者可以用溶解样品的溶剂走一个空白，这样就知道是不是样品出现两个峰了。

作者: maomi530 时间: 2010-4-3 09:29

QUOTE:

原帖由 eedc-dcnge 于 2010-4-3 09:28 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
因为你是用非流动相溶解样品的，这样样品溶液与流动相的组成不同，检测器有吸收，建议用流动相溶解样品，可以大大减小溶剂的响应，或者可以用溶解样品的溶剂走一个空白，这样就知道是不是样品出现两个峰了。 ...

我们做时很少用流动相溶解样品，也没出现楼主那样的问题，所以流动相的原因比较小，除非有特殊要求！

作者: unknow 时间: 2010-4-3 09:38 标题: 回复 #3 胖猫猫的帖子

溶剂影响保留时间比较常见，但能将药物本身“两极分化”我还没见过，不知发生这种情况的是哪个药，又是具体的什么溶剂、在什么流动相中发生的状况，希望能说得更具体些，大家好一起探讨。

既然是分成了两个峰，说明药物本身在溶剂中已发生了差别较大的极性或形态上的分级，有条件的话可用LC-MS、核磁等做深入研究。

作者: chongwenmen 时间: 2010-4-3 10:41

QUOTE:

原帖由 胖猫猫 于 2010-4-2 17:18 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
RT
遇到过几次非流动相溶解的样品时，待测物出现双峰的情况，不是峰分叉，是很明显的两个峰。
虽然知道怎么解决，但是很想知道可能出现这种现象的原因，请各位前辈指导一下好吗？

1、出现两个保留时间相差大概5分钟的峰，第一 ...

1、可能是溶剂峰，或者你样品中本来就存在两个物质。
2、溶剂对峰形和保留时间有一定的影响，但只要对照品和样品使用相同的溶剂，可以消除这个影响。
最好楼主能上个图看一下。

作者: kflsjjfdl 时间: 2010-4-3 10:43

第一个问题：会不会你所用溶剂与样品在与流动相汇合时产生溶剂效应，甚至发生反应，生成另一种物质，虽然不是溶剂峰，也可能溶剂的引入使得这中效应加剧！

第二个问题：我所以有上述想法正是基于你第二个问题的情况来猜测！

作者: emuchhh 时间: 2010-4-3 11:27

药物在溶剂中的有机相有溶解，换一一种有机成分试试

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-3 11:40

感谢各位的回复，我一起回复啦，不然变成我刷版了。呵呵
第一柱子没有问题的，换溶剂溶解峰形就正常了，其它待测物事正常的峰，只有那种待测物是那样的。
第二，进空白溶剂，空白流动相都不会在相同位置有峰，所以觉得应该不是溶剂峰，
第三，两个峰分的很远的一个药是克拉维酸钾，当时看到有一篇文献也提到这个问题，但是原因没有解释清楚。另外一个药是一种中药的提取物。
第四，只有一个药的图谱现在有保存，晚点我把另外一个药物的图传上来。
第五，溶剂效应能理解，但是不知道具体是怎么样的原理，到底什么样的药物会有这样的问题出现呢，有个朋友也遇到我这样的问题，她是做代谢物的，当时还误以为是两种物质，后来也是换了溶剂溶解样品，就没有这样的问题了。

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-3 13:14

图放一楼了，呵呵。

作者: entd_jps 时间: 2010-4-3 16:53

QUOTE:

原帖由 胖猫猫 于 2010-4-3 11:40 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
感谢各位的回复，我一起回复啦，不然变成我刷版了。呵呵
第一柱子没有问题的，换溶剂溶解峰形就正常了，其它待测物事正常的峰，只有那种待测物是那样的。
第二，进空白溶剂，空白流动相都不会在相同位置有峰，所以觉得应该不是溶剂峰 ...

楼主，标准的鬼峰

作者: ccf335 时间: 2010-4-3 16:55

样品不用流动相溶解也是可以的，但有一点要注意：溶解样品的溶剂不能比流动相强，只能比流动相弱。

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-3 17:02 标题: 回复 #13 entd_jps 的帖子

不知道前辈对鬼峰的定义是什么，这个现象有重现性的，不知道能不能算作鬼峰了。

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-3 17:05 标题: 回复 #14 ccf335 的帖子

听说过您说的这种观点，但是一直没有搞清楚，所谓不能比流动相强，更具体的是什么？
对于反相色谱来说，这句话是不是可以理解成：溶剂的极性不能比流动相的极性弱呢？
可否请您再指点一下。^_^

作者: ccf335 时间: 2010-4-3 20:17

QUOTE:

原帖由 胖猫猫 于 2010-4-3 17:05 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
听说过您说的这种观点，但是一直没有搞清楚，所谓不能比流动相强，更具体的是什么？
对于反相色谱来说，这句话是不是可以理解成：溶剂的极性不能比流动相的极性弱呢？
可否请您再指点一下。^_^ ...

就是溶解样品溶剂的洗脱能力比流动相要小。就是你说的溶剂的极性要大，对反相色谱来说。

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-3 21:49 标题: 回复 #17 ccf335 的帖子

明白了。非常感谢。

作者: kflsjjfdl 时间: 2010-4-4 11:05

QUOTE:

药方面我接触的很少，我朋友多些，这个道理就跟衍生进样差不多！！

作者: 命运--ses 时间: 2010-4-4 15:14

QUOTE:

原帖由 chongwenmen 于 2010-4-3 10:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

1、可能是溶剂峰，或者你样品中本来就存在两个物质。
2、溶剂对峰形和保留时间有一定的影响，但只要对照品和样品使用相同的溶剂，可以消除这个影响。
最好楼主能上个图看一下。 ...

赞同楼主说法！

作者: chongwenmen 时间: 2010-4-4 19:12

QUOTE:

看了你的图，我怎么觉得出两个峰比一个峰正常，是不是溶剂对溶质的形态有影响，楼主提供的信息还是不够多，两个溶剂各是什么？既然猜测是克拉维酸钾，是不是可以进一个确定一下。

作者: haohaorenjia 时间: 2010-4-5 10:39

QUOTE:

从谱图上看，感觉：
1.分析条件不一样
2.后面的两个峰的峰形要好一些。
3.第一个峰的极限对吗？

欢迎探讨、切磋。

作者: thereyoube 时间: 2010-4-5 10:44

图谱没么上来啊。。。

1是这样的，那个药物遇到乙腈的时候，就会出现双峰，一个峰在死时间附近出，大概2点几分钟，另外一个在6分钟附近，具体时间记不清楚了。后面一个会受流动相比例的影响，但是2分钟附近出的我确定不是溶剂峰。

有可能是乙腈使物质分解或者是你的样品是混合物
2是另外的药物，流动相溶解得时候是一个峰，不同比例的溶剂溶解时，会出双峰，两个峰的比例会变化的。

有可能是你的样品是混合物，色谱条件不好

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-5 12:39 标题: 回复 #21 chongwenmen 的帖子

标准品和待测物溶剂一致的时候，出峰情况和待测物一样的。克拉维酸钾标准品溶液里添加乙腈，就会边双峰的。

图中给出的不是克拉维酸的图，是我说的另外一个样品，流动相是甲醇水，两张图是同一色谱条件出的。纯甲醇溶剂的标准品就会出双峰。流动相溶的就不会。

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-5 12:41

分析条件是一样的，完全是同一条件下走出的两针，我反复进过几次样，效果是一样的。
您说的，第一个峰的“极限”指的是什么呢？

作者: 胖猫猫 时间: 2010-4-5 12:46 标题: 回复 #23 thereyoube 的帖子

标准品出峰情况一样，用的是中检所的标准品，
难道是溶剂中有跟待测同一质核比的干扰？我该考察一下。

作者: 灰蓝之海sw 时间: 2010-4-5 16:35

可能是有杂质同时流出，也可能是发生峰分叉。第一种情况需要改变流动相来改善分离度；第二种的话最好让溶剂与初始流动相保持一致

作者: aasle 时间: 2010-4-5 22:39

建议你把出峰时间控制到10分钟以后看情况如何？

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