分析测试百科

标题: 使用缓冲盐和有机相为流动相，有可能分开这一对映体吗？ [打印本页]

作者: chen389988 时间: 2010-4-25 10:19 标题: 使用缓冲盐和有机相为流动相，有可能分开这一对映体吗？

如果分析一个有手性碳的物质，使用反相色谱柱，在不加入手性拆分试剂的情况下，使用缓冲盐和有机相为流动相，有没有可能分开这一对映体？在检测过程中出现在有机相比例较低的情况下，理论上是一个物质的，却出来两个峰，这两个峰的分离度很差，只能看到峰尖处有分开。

作者: aa_tang 时间: 2010-4-25 11:42 标题: 回复 #1 chen389988 的帖子

有个疑问：楼主待分离的手性化合物，只有一个手性中心还是有几个？若只有一个手性碳的话，C18柱，同时流动相中又没有添加手性拆分试剂的情况下，是不可能分开的；当然了，若有2个手性中心或者多个手性中心，那么在此条件下，非对映异构体则完全有可能分开。

根据楼主的描述，个人认为是溶解样品的溶剂对色谱分离产生了影响，也就是大家通常所说的“溶剂效应”，试用比起始流动相洗脱强度小的溶剂溶解样品或者直接用初始流动相溶解样品，看是否还有这种现象？

作者: eesa_dc_seein 时间: 2010-4-26 09:54

看到过，儿茶素和表儿茶素好像是没用手性色谱柱或手性流动相，但是不多。

作者: maicaixiaogu 时间: 2010-4-26 13:47

理论上没有手性柱或手性流动相，是不可能把手性分子的两种构型在普通C18柱子上分离开，但是如果有两个手性中心，其中的非手性对映异构体是能够分离开的，而手性对映异构还是不能分离。
你说的情况像是主峰分叉，有可能是因为稀释剂比流动相极性小。

作者: chen389988 时间: 2010-4-26 13:57

我的样品是直接使用缓冲盐溶解的，没有加入有机相。

作者: maicaixiaogu 时间: 2010-4-27 10:27

那就试试降低样品浓度和进样量，一直到一个很小的值，如果还是一直分叉，那就不是稀释剂和样品浓度的问题。
如果是异构体的分离，在样品峰变小时分离度会增加，很小的时候有可能达到完全分离。
如果降低样品浓度使样品峰变成单峰，则说明不是手性分离

作者: chen389988 时间: 2010-4-27 15:22

虽然没有把样品稀释到最小，但也不大了，峰高只有300mv，这个不高呀，基本可以用于含量测定的峰高。

作者: maicaixiaogu 时间: 2010-4-28 10:17

我的意思是你把样品稀释到定量限水平，这样可以排除样品峰分叉的可能

作者: chen389988 时间: 2010-4-28 15:04

明白，有空做一个看看

欢迎光临分析测试百科 (http://bbs.antpedia.com/)