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标题: 【求助】用碧云天BCA试剂盒测蛋白质浓度，用酶标仪... [打印本页]

作者: free 时间: 2013-10-9 11:15 标题: 【求助】用碧云天BCA试剂盒测蛋白质浓度，用酶标仪...

BCA试剂盒测蛋白质浓度，用酶标仪，请问怎样根据标准曲线计算

作者: u234 时间: 2013-10-9 11:16

我们实验室有个专门的软件但我想EXCEL应该也可以你可以试试

作者: kuohao17 时间: 2013-10-9 11:16

可以用Origin啊，很好的软件。

作者: taoshengyijiu 时间: 2013-10-9 11:16

一般是测量od562nm的波长，用excel先作出散点图，然后，点右键，添加趋势，即可给出曲线方程。

作者: remenb 时间: 2013-10-9 11:17

用SPSS 很好用的我们实验一直这样做的
先做标准曲线
以蛋白标准的量为自变量吸光度为因变量
得到一个方城y=a+bx 然后x=(y-a)/b
根据已知的吸光度和方程用EXCEL一拖就可以了
非常方便

作者: moonlight45 时间: 2013-10-9 11:17

酶标仪不是直接可以打出一个图来吗？有标准曲线，然后有样品的吸光度值，直接在曲线上找相应的浓度值，不是这样吗？我还没做过，但感觉好像是这样，难道我一直都想错了？还得用软件分析？多谢各位解迷

作者: any333 时间: 2013-10-9 11:17

Excel就足够了，没有那么复杂。酶标仪读出标准蛋白和样品OD值后，用空白对照的OD值对所有蛋白的OD值进行校正；
再用已知的蛋白标准品浓度与校正后的对应OD值在Excel中做出标准曲线，注意添加趋势线时有多选框，把曲线方程和R平方值选中，就可以得到标准曲线方程；
最后将校正后的样品OD值代入上述方程中，即可得出样品的浓度。

注意：1. R平方值至少要有2个9，如0.991；
2. 样品OD值最好落在标准曲线中部；
3. 测得的蛋白浓度不是绝对浓度。

作者: owanaka 时间: 2013-10-9 11:18

标准曲线的空白一定是0吗？加蛋白量是从0，1，2，4....ml开始的，但我的第一个加0ml蛋白的OD值都不是零？

作者: 3N4G 时间: 2013-10-9 11:18

QUOTE:

原帖由 owanaka 于 2013-10-9 11:18 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
标准曲线的空白一定是0吗？加蛋白量是从0，1，2，4....ml开始的，但我的第一个加0ml蛋白的OD值都不是零？

调零后不就是0了吗？哈哈

作者: fei1226com 时间: 2013-10-9 11:19

"Excel就足够了，没有那么复杂。酶标仪读出标准蛋白和样品OD值后，用空白对照的OD值对所有蛋白的OD值进行校正；
再用已知的蛋白标准品浓度与校正后的对应OD值在Excel中做出标准曲线，注意添加趋势线时有多选框，把曲线方程和R平方值选中，就可以得到标准曲线方程；
最后将校正后的样品OD值代入上述方程中，即可得出样品的浓度。

注意：1. R平方值至少要有2个9，如0.991；
2. 样品OD值最好落在标准曲线中部；
3. 测得的蛋白浓度不是绝对浓度。 "

我觉得是完全正确的啊我们就是这么做其实很简单不用什么软件的

作者: memory 时间: 2013-10-9 11:20

酶标仪、EXCEl、SPSS等都可以完成这项工作，使用取决于个人的偏好和有没有这些软件。

作者: nn255 时间: 2013-10-9 11:20

"Excel就足够了，没有那么复杂。酶标仪读出标准蛋白和样品OD值后，用空白对照的OD值对所有蛋白的OD值进行校正；
再用已知的蛋白标准品浓度与校正后的对应OD值在Excel中做出标准曲线，注意添加趋势线时有多选框，把曲线方程和R平方值选中，就可以得到标准曲线方程；
最后将校正后的样品OD值代入上述方程中，即可得出样品的浓度。

我想问一下，所说的用空白校正是怎么做呢，在加蛋白标准品时顺序是0、1、2、4...，那么在这里的“0”是不是就是所谓的空白呢？

作者: www.1 时间: 2013-10-9 11:21

Excel就足够了，没有那么复杂。酶标仪读出标准蛋白和样品OD值后，用空白对照的OD值对所有蛋白的OD值进行校正；
再用已知的蛋白标准品浓度与校正后的对应OD值在Excel中做出标准曲线，注意添加趋势线时有多选框，把曲线方程和R平方值选中，就可以得到标准曲线方程；
最后将校正后的样品OD值代入上述方程中，即可得出样品的浓度。

注意：1. R平方值至少要有2个9，如0.991；
2. 样品OD值最好落在标准曲线中部；
3. 测得的蛋白浓度不是绝对浓度。

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请问，如何做到 “用空白对照的OD值对所有蛋白的OD值进行校正？”

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