标题:
【求助】二抗用荧光二抗图怎么看啊?
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作者:
leifengta
时间:
2013-11-9 23:58
标题:
【求助】二抗用荧光二抗图怎么看啊?
这几天做wb二抗用的是荧光二抗,用红外荧光成像系统照相,照的图像就和蛋白胶一样,怎么看啊?谢谢各位高手指点
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http://bbs.antpedia.com/attachment.php?aid=20212
作者:
ritou1985
时间:
2013-11-9 23:58
QUOTE:
原帖由
leifengta
于 2013-11-9 23:58 发表
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这几天做wb二抗用的是荧光二抗,用红外荧光成像系统照相,照的图像就和蛋白胶一样,怎么看啊?谢谢各位高手指点
楼主的图像,条带还可以。
用红外荧光成像系统照相,照的图像就和蛋白胶一样,怎么看啊?
楼主可能是刚开始用红外荧光成像系统照相,还不熟悉该软件。
你可以调成灰度,之后可以调节其强度,这样你就可以分析了。
照的图像就和蛋白胶一样,你指的是图中发白的部分?
这个是由于你扫描的时候强度太大所致,可以调小扫描时的激光强度。自然就可以了。
作者:
leifengta
时间:
2013-11-9 23:59
标题:
回复 #2 ritou1985 的帖子
谢谢指点。我还有个疑问,marker条带不应该发荧光,因为它没与荧光二抗接触啊,可是我们看到的marker条带是怎么一回事啊
作者:
ending
时间:
2013-11-10 00:00
Marker是可以发荧光的。我用的Marker大多条带在红色荧光时很清楚,三条带在绿色荧光时很清楚。如果显示不了MARKER,那你的MARKER就没有什么作用了。
作者:
moonlight45
时间:
2013-11-10 00:01
marker是预染的
作者:
jiushikeshui371
时间:
2013-11-10 00:01
调整一抗、二抗浓度
作者:
bluelake
时间:
2013-11-10 00:01
求助做400Kd的蛋白,分离胶应选择的浓度,电泳时间,转膜时间,以及该如何选择内参?谢谢
作者:
yapuyapu
时间:
2013-11-10 00:01
内参选择和其他低分子量的蛋白没什么区别,GAPDH B-ACTIN B-TUBLIN都可以的;转膜时间上,这么大的分子倒没做过,118KD的蛋白300MA至少要转两个半小时,你顺理推算一下摸索摸索吧,电泳时胶浓度也要摸索,肯定要用8%的分离胶,时间也要摸索,呵呵 加个MARKER看看就知道了。 实践了真知,祝实验顺利
作者:
ii077345
时间:
2013-11-10 00:03
我也准备用荧光标记的二抗做western,能请教您一下试验方法吗?和一般的western方法是一样的吗?谢谢
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